[發明專利]肌酐測定試劑

無效

• 申請號: 201310704186.4
• 申請日: 2013-12-19
• 公開（公告）號: CN103773833A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 王榮光;呂斌斌;張繼明
• 申請（專利權）人: 深圳市雷諾華科技實業有限公司
• 主分類號: C12Q1/34
• 分類號: C12Q1/34;C12Q1/32;C12Q1/26
• 代理公司: 深圳市世紀恒程知識產權代理事務所 44287
• 代理人: 胡海國;于志光

技術領域

本發明涉及醫學臨床化驗技術領域，特別涉及肌酐測定方法和肌酐測定試劑。

背景技術

肌酐是一種低分子含氮化合物，分子量116000，主要由肌肉代謝產生。在肌肉中，肌酸主要通過不可逆的非酶脫水反應緩緩地形成肌酐，再釋放到血液中，隨尿排泄。在正常情況下，人體的肌酐含量基本保持穩定。血漿肌酐的正常上限值為100微摩爾/升左右。肌酐是小分子物質，可通過腎小球濾過，所以血清肌酐的濃度變化主要由腎小球的濾過能力來決定。濾過能力下降，則肌酐濃度升高。血肌酐值高出正常值多數意味腎臟受損，尿肌酐的含量高則可以反映腎過濾功能受損，因此肌酐的化驗值能較準確的反應腎功能的情況。

目前醫學臨床測定血漿和尿肌酐主要采用酶催化法和化學測定法。其中酶催化法主要包括肌酸脒基水解酶和肌酐亞氨基水解酶水解進行測量肌酐的兩種方法。

肌酸脒基水解酶測量肌酐的方法包括兩步反應，具體詳細步驟如下：

第一步：

第二步：

該方法采用雙試劑法去除肌酸，第一步和第二步中的肌酸先后會呈色，因此第一步產生的醌亞胺為空白節點，以第二步產生的醌亞胺為標準計算帶測定的標樣中的肌酐的量。該方法顯色靈敏度高、線性反應寬、試劑穩定性好的特點，但受維生素C、溶血和膽紅素的干擾而影響結果。

肌酐亞氨基水解酶測量肌酐的方法步驟如下：

采用該方法在340nm測定谷氨酸吸光度的下降速率，便可以計算肌酐的含量。該方法使用時膽紅素、乳糜、維生素C、溶血以及常用藥物均不干擾此法對肌酐的測定。但試劑不夠穩定、而且所用肌酐亞胺水解酶價格高。

發明內容

本發明的主要目的彌補現有兩種常用肌酐化驗方法的缺陷，提供一種通過監測340nm變化，既能避免維生素C、溶血和膽紅素的干擾，同時試劑穩定性好、價格低的血漿中肌酐測定試劑。

本發明提出了一種肌酐測定試劑，包括試劑1和試劑2；其中，

所述試劑1包括：

所述試劑2包括：

優選地，所述防腐劑為ProClin系列防腐劑。

優選地，所述防腐劑為ProClin300。

優選地，所述表面活性劑和穩定劑為海藻糖。

優選地，所述試劑1包括：

N-三（羥甲基）甲基-3-氨基丙磺酸緩沖液（PH7.4）25mmol/L；

所述試劑2包括：

N-三（羥甲基）甲基-3-氨基丙磺酸緩沖液（PH7.6）100mmol/L；

優選地，所述試劑1包括：

N-三（羥甲基）甲基-3-氨基丙磺酸緩沖液（PH7.4）25mmol/L；

所述試劑2包括：

N-三（羥甲基）甲基-3-氨基丙磺酸緩沖液（PH7.6）100mmol/L；

采用本發明的肌酐測定試劑，采用了甲醛脫氫酶-NADH，消除了肌酸脒基水解酶測量肌酐方法受維生素C、溶血和膽紅素的干擾的缺點；且消除了肌酐亞氨基水解酶測量肌酐方法中試劑成分不穩定的問題；并且測試結果穩定準確。

具體實施方式

應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

本發明提出一種肌酐測定試劑，該肌酐測定試劑包括試劑1和試劑2；

其中試劑1的各組成和濃度范圍為：

試劑2的各組成和濃度范圍為：

采用本發明的上述肌酐測定試劑進行血樣標本中肌酐含量測定的原理主要包括由上述肌酐測定試劑中試劑1和試劑2的“肌酸脒基水解酶、肌酐水解酶、肌氨酸氧化酶、甲醛脫氫酶”這四種酶催化的第一步反應和第二步反應。

其中，第一步反應原理為：

第二步反應原理為：