[發明專利]一種東方百合組培苗壯苗的方法

有效

• 申請號: 201310703076.6
• 申請日: 2013-12-18
• 公開（公告）號: CN103733994A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 夏宜平;吳昀;張佳平;馬怡迪;張琳;劉冰;李丹青
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明屬于組織培養領域，具體涉及一種東方百合組培苗壯苗的方法。

背景技術

百合（Lilium?spp.）被譽為“球根花卉之王”，是世界五大鮮切花之一。近年來，隨著我國國民生活水平的提升，百合消費量亦逐年升高。但長期以來，我國切花百合尤其是主流品種東方系百合‘索邦’（L.oriental?hybrids‘Sorbonne’）商品品種長期依賴進口（以荷蘭為主），而種球的進口成本占總生產成本的極高比例。因而，東方百合種球國產化是降低生產成本，提高銷售利潤的重要途徑。

解決種球國產化的一項有效措施是建立完善的新鱗莖培養體系。但目前百合種球工廠化生產中常遇到百合的組培苗生長勢弱、根葉細長柔軟、鱗莖發育慢、移栽過程中成活率低、容易重新感染病毒等突出問題。而這些問題的主要根源則是組培苗移栽時試管球不達標準。

植物生長調節劑是一類人工合成的，具有植物激素活性的物質，是外源的非營養性化學物質，通?？稍谥参矬w內傳導至作用部位，以極低的濃度就能促進或抑制其生命過程中的某些環節。多效唑（Paclobutrazol），又稱PP333，是一種三唑類植物生長調節劑，經由植物的根、莖、葉吸收，然后經木質部傳導到幼嫩的分生組織部位，抑制赤霉素的生物合成。

在一些試驗中，多效唑可應用于培養健壯的組培苗。公開號為CN102090331A的中國專利文獻公開了一種郁金香組培苗壯苗的方法，將郁金香組培苗轉接到添加了2mg～8mg/L的多效唑的MS液體培養基中培養；培養條件為溫度23±2℃，光照1500～2000Lx，濕度75%～80%。百合與郁金香均屬于球根花卉中的鱗莖類，地下部主要由葉變態而來，盡管該專利公開了通過在MS液體培養基中添加一定濃度的多效唑能夠促使郁金香組培苗的鱗莖膨大，但郁金香屬于有皮鱗莖，而百合則屬于無皮鱗莖，此特征形成二者在組織培養上的巨大差異，同時百合與郁金香在分類學上分屬于百合屬與郁金香屬，形態及內部組織生理生化狀態完全不同，因此，顯然的不能夠簡單的將上述專利的技術方案應用于百合組培苗的生產中。

就百合組培工廠化生產而言，如何通過優化組織培養條件，培養膨大的試管鱗莖，從而促進壯苗、改善組培苗質量、縮短組培苗在大田生長周期、提高移栽成活率，且有利于種球的貯藏、運輸和種質保存，是亟待解決的技術問題。

發明內容

本發明提供了一種東方百合組培苗壯苗的方法，能夠有效促進組培苗鱗莖的膨大和增重，改善了鱗莖的質量，有利于獲得健壯的組培苗。

一種東方百合組培苗壯苗的方法，包括：

（1）取東方百合的無菌苗，切割獲得鱗莖，從鱗莖上剝取鱗片，將所述鱗片置于誘導培養基中進行芽誘導培養；

（2）誘導出芽后，將芽接至生根壯球培養基中進行培養，獲得組培苗。

其中，所述生根壯球培養基的組成為：MS粉，4～5g/L；蔗糖，60～70g/L；瓊脂，6～8g/L；多效唑，5×10^-4～5×10^-2mmol/L。

鱗莖質量的優劣直接影響組培苗的移栽成活率及其在大田的生長周期，本發明對生根壯球培養基進行優化，通過在生根壯球培養基中添加適宜濃度的多效唑，可促使組培苗的鱗莖膨大，重量增加，提高了鱗莖的質量，從而有助于獲得健壯的組培苗。優選的，生根壯球培養基中，所述多效唑的濃度為5×10^-4～5×10^-3mmol/L，更優選的，所述多效唑的濃度為5×10^-4mmol/L。

步驟（1）中，將東方百合無菌苗分為兩部分，其中一部分進行基礎的增殖培養，另一部分作為生產組培苗的原材料，取其鱗片進行芽誘導培養。這樣，在已有的東方百合無菌苗的基礎上，試管苗一方面作為生產組培苗的原材料，另一方面還不斷進行基礎增殖培養，擴繁大量的東方百合無菌苗，保證了充足的原材料來生產組培苗，從而形成可循環的程序化操作步驟，縮短生產周期，適合于工業化生產，且所獲組培苗均一化程度高。

選取鱗莖時，如果鱗莖過小，鱗片較嫩誘導時不易成活，當鱗莖直徑達0.5～0.8cm較為適宜。

鱗莖中不同部位的鱗片誘導出芽的能力按照從外到內逐漸增強，內部鱗片幾乎不能形成誘芽，通常，選取鱗莖由外至內的第1～2層鱗片進行芽誘導培養。

一般來說，百合芽點萌發部位均在鱗片內側基部切口處，因此，在進行芽誘導培養時，將鱗片凹面朝上置于誘導培養基中。