[發明專利]一種東方百合組培苗壯苗的方法

有效

• 申請號: 201310703009.4
• 申請日: 2013-12-18
• 公開（公告）號: CN103688864A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 吳昀;夏宜平;沈柏春;常樂;張佳平;佘琳芳;王冠群
• 申請（專利權）人: 杭州市園林綠化股份有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明屬于組織培養領域，具體涉及一種東方百合組培壯苗的方法。

背景技術

腐植酸（Humic?Acid,HA）是自然界中廣泛存在的，由生物（主要是植物）的殘骸經過微生物分解和一系列地球化學過程而形成的有機質，是一類成分復雜的天然有機物質。HA由于其結構復雜，屬于一種無定型的高分子化合物，通常我們所說HA的分子量，指的是其平均分子量。

1919年Oden提出將HA分為水溶性的黃腐酸、乙醇可溶的棕腐酸和堿溶性的黑腐酸。目前，腐植酸已廣泛應用于農林牧、石油、化工、建材、醫藥衛生、環保等各個領域中，且由于我國泥炭資源中腐植酸含量豐富，具備大量潛在可大力開發的資源。

此外，腐殖酸對植物的生理活動也有促進作用。綜合文獻報道，其對植物的影響可以概括為以下幾個方面，第一，促進種子萌發，類似GA，可使種子提前萌發，且發芽率高，苗全，苗壯。第二，促進根系活力，有“根系肥料”的稱號。第三，促進植物中酶活性的增加，使呼吸強度、光合作用強度均有所提高，對物質的合成、運轉、積累有利。第四，提高作物抗逆性，包括抗旱、防寒、抗病蟲害。而從腐殖酸品種來看，分子量小、活性官能團含量高的黃腐酸對植物的促進作用更為明顯，生理活性大。

百合（Lilium?spp.）被譽為“球根花卉之王”，是世界五大鮮切花之一。近年來，隨著我國國民生活水平的提升，百合消費量亦逐年升高。但長期以來，我國切花百合尤其是主栽品種東方系百合‘索邦’（L.oriental?hybrids‘Sorbonne’）商品球長期依賴進口（以荷蘭為主），而種球的進口成本則占總生產成本的極高比例。因而，東方百合種球國產化是降低生產成本，提高銷售利潤的重要途徑。

解決種球國產化的一項有效措施是建立完善的新鱗莖培養體系。但目前百合種球工廠化生產中常遇到百合組培苗生長勢弱、根葉細長柔軟、鱗莖發育慢、移栽過程中成活率低、容易重新感染病毒等突出問題。而這些問題的主要根源則是組培苗移栽時試管球不達標準。

就百合組培工廠化生產而言，如何通過優化組織培養條件，培養膨大的試管鱗莖，從而促進壯苗、改善組培苗質量、縮短組培苗的大田生長周期、提高移栽成活率，又利于種球的貯藏、運輸和種質保存，是亟待解決的技術問題。在一些試驗中，多效唑可應用于培養健壯的組培苗。如公開號為102090331A的中國專利文獻公開了一種郁金香組培苗壯苗的方法，將郁金香組培苗轉接到添加了2mg～8mg/L的多效唑的MS液體培養基中培養；培養條件為溫度23±2℃，光照1500～2000Lx，濕度75%～80%。然而目前，并未有任何關于腐植酸應用于百合組織培養中的報道。

發明內容

本發明提供了一種東方百合組培苗壯苗的方法，能夠有效促進組培苗鱗莖的膨大和增重，改善了鱗莖的質量，有利于獲得健壯的組培苗。

一種東方百合組培壯苗的方法，包括：

（1）取東方百合的無菌苗，切割獲得鱗莖，從鱗莖上剝取鱗片，將所述鱗片置于誘導培養基中進行芽誘導培養；

（2）誘導出芽后，將芽接至生根壯球培養基中進行培養，獲得組培苗；

其中，所述生根壯球培養基的組成為：MS粉，4～5g/L；蔗糖，60～70g/L；瓊脂，6～8g/L；腐殖酸，0.2～20mg/L；所述腐殖酸中黃腐酸的含量≥90%。

鱗莖質量的優劣直接影響組培苗的移栽成活率及其在大田的生長周期，本發明對生根壯球培養基進行優化，通過在生根壯球培養基中添加適宜濃度的腐植酸，可促使組培苗的鱗莖膨大，重量增加，提高了鱗莖的質量，從而有助于獲得健壯的組培苗。優選的，生根壯球培養基中，所述腐植酸的濃度為0.1～0.3mg/L，更優選的，所述腐殖酸的濃度為0.2mg/L。

本發明中腐殖酸具體可購于上海晶純生化科技股份有限公司，品牌為阿拉丁，貨號為H108498，內含黃腐酸（FA）≥90%，活性官能團含量高。

步驟（1）中，將東方百合無菌苗分為兩部分，其中一部分進行基礎的增殖培養，另一部分作為生產組培苗的原材料，取其鱗片進行芽誘導培養。這樣，在已有的東方百合無菌苗的基礎上，無菌苗一方面作為生產組培苗的原材料，另一方面還不斷進行基礎增殖培養，擴繁大量的東方百合無菌苗，保證了充足材料來生產組培苗，從而形成可循環的程序化操作步驟，縮短生產周期，適合于工業化生產，且所獲組培苗均一化程度高。

選取鱗莖時，如果鱗莖過小，鱗片較嫩誘導時不易成活，當鱗莖直徑達0.5～0.8cm較為適宜。