[發(fā)明專利]一種檢測和鑒定沙門氏菌1,4,[5],12:i:-的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310700325.6
• 申請日: 2013-12-18
• 公開（公告）號: CN103725780A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊小鵑;吳清平;張菊梅
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省微生物研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/10
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種檢測和鑒定沙門氏菌1,4,[5],12:i:-的方法。

背景技術(shù)：

沙門氏菌（Salmonella?spp）是公共衛(wèi)生學(xué)上具有重要意義的人畜共患病病原菌，在世界各地的食物中毒事件中，沙門氏菌引起的中毒病例常列榜首。目前全世界已發(fā)現(xiàn)約2600種沙門氏菌血清型，其中腸炎沙門氏菌（Salmonella?Enteritidis）和鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella?Typhimurium）是引起人類感染最多的兩種血清型。20世紀(jì)90年代初以來，一種與鼠傷寒沙門氏菌具有相似的抗原式，并在遺傳關(guān)系上與之緊密聯(lián)系的新的血清型——沙門氏菌1,4,[5],12:i:-，不斷被檢出。且近十年，在全球多個(gè)國家其檢出率大幅度增加，呈現(xiàn)上升趨勢，引起危害嚴(yán)重的人類疾病和暴發(fā)流行。

由于很長一段時(shí)間內(nèi)，沙門氏菌1,4,[5],12:i:-一直錯(cuò)誤地被歸為鼠傷寒沙門氏菌，所以在20世紀(jì)90年代之前，很少有“沙門氏菌1,4,[5],12:i:-”的報(bào)道。文獻(xiàn)資料顯示，最早是在1946年由Edwards和Brunner分離了3株僅具有第Ⅰ相鞭毛抗原的“鼠傷寒沙門氏菌”，然后Kauffmann于1965年記錄了1株“鼠傷寒沙門氏菌Ⅰ相單相菌”。20世紀(jì)90年代以來，沙門氏菌1,4,[5],12:i:-在全球多個(gè)國家被分離和鑒定。在世界范圍內(nèi)，沙門氏菌1,4,[5],12:i:-分布廣泛，這種新發(fā)現(xiàn)的血清型不僅在人類糞便、血液中分離，而且在雞、牛、豬、甲魚等動物和禽肉、豬肉和香腸等食品中分離，并在多個(gè)國家引起特定的沙門氏菌病的暴發(fā)和流行。在亞洲，沙門氏菌1,4,[5],12:i:-較早分離于泰國，之后由其引起的患病人數(shù)不斷增加，被列為泰國引起沙門氏菌病的5種主要血清型之一。沙門氏菌1,4,[5],12:i:-在臺灣，韓國，中國等國家均有引起食源性疾病的報(bào)道。在歐洲，一些研究發(fā)現(xiàn)沙門氏菌1,4,[5],12:i:-引起人類的感染與豬肉及其制品有關(guān)。自沙門氏菌1,4,[5],12:i:-于1997年在西班牙正式被報(bào)道后，檢出率不斷增加，被列為西班牙引起疾病的5種主要血清型之一，更成為西班牙豬中最常見和豬肉制品中第二常見的血清型。2006年，盧森堡發(fā)生了兩起因食用被僅具有第Ⅰ相鞭毛抗原的Ⅰ相單相菌1,4,[5],12:i:-DT193污染的豬肉食品而導(dǎo)致的沙門氏菌病暴發(fā)流行，133人致病，24人住院治療，1人死亡。2005-2008年，沙門氏菌1,4,[5],12:i:-的檢出率在法國從第11位上升到第3位，并分別在2010、2011年發(fā)生兩次由污染了沙門氏菌4,[5],12:i:-的干豬肉香腸引起的沙門氏菌病暴發(fā)流行。在美洲，沙門氏菌1,4,[5],12:i:-已被列為美國6種引起人類疾病主要血清型之一。2007年污染了沙門氏菌4,5,12:i:-的冷凍禽肉派引起波及多個(gè)州的沙門氏菌病暴發(fā)流行。

沙門氏菌1,4,[5],12:i:-引起人類食源性疾病的快速增長，帶來嚴(yán)重危害，因此研究這種新血清型的產(chǎn)生、來源，以及與其它血清型的遺傳關(guān)系的研究尤為重要。通過包括噬菌體分型（Phage?Typing）、脈沖場凝膠電泳（Pulsed-Field?Gel?Electrophoresis，PFGE）、多位點(diǎn)序列分析（Multilocus?Sequence?Typing，MLST），隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random?Amplified?Polymorphic?DNA?analysis，RAPD)以及PCR法分析特有基因片段等研究發(fā)現(xiàn)，沙門氏菌1,4,[5],12:i:-與鼠傷寒沙門氏菌具有很高的遺傳相似度，推測1,4,[5],12:i:-血清型可能是鼠傷寒沙門氏菌的Ⅰ相菌單相變種。