[發(fā)明專(zhuān)利]中成藥益腎補(bǔ)骨液的質(zhì)量控制方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310699363.4
• 申請(qǐng)日: 2013-12-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103675190A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付成國(guó);徐建;白冰;徐國(guó)強(qiáng);徐云;王婷婷;趙俞;任晶
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 吉林修正藥業(yè)新藥開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/90
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/90;G01N30/02
• 代理公司: 吉林省長(zhǎng)春市新時(shí)代專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 22204
• 代理人: 孫國(guó)振

1.一種中成藥益腎補(bǔ)骨液的控制質(zhì)量方法，其特征是包括以下步驟：

（1）鑒別

①白芍的薄層鑒別：取益腎補(bǔ)骨液30～50ml，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加中性氧化鋁（100～200目）1～2g，拌勻，蒸干，加在中性氧化鋁柱（100～200目，2～3g，內(nèi)徑為1.5cm）上，用甲醇-乙酸乙酯（1:3）40～50ml洗脫，棄去洗脫液，再用甲醇-乙酸乙酯（1:1）40～50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖?～3ml使溶解，作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含0.5～1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述供對(duì)照品溶液和試品溶液各3～5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯-水為展開(kāi)劑，四組份的配比為38:10:5:0.2或40:10:5:0.2，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；

②骨碎補(bǔ)的薄層鑒別：取柚皮苷對(duì)照品，加甲醇或乙醇或70%乙醇制成每1ml含1～1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取[鑒別]（1）項(xiàng)下的供試品溶液作為供試品溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照品溶液各5～10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水的上層溶液為展開(kāi)劑，四組份的配比為1:12:2.5:3或1:10:2:3或1.5:12:2.5:2.5，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5～10%三氯化鋁乙醇溶液，在105℃加熱3～5分鐘，置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；

③當(dāng)歸的薄層鑒別：取益腎補(bǔ)骨液30～40ml，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，繼用1%碳酸氫鈉溶液振搖提取2次，每次30ml,合并碳酸氫鈉溶液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3，再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30～40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖蓟蛞宜嵋阴?～2ml使溶解，作為供試品溶液，另取當(dāng)歸對(duì)照藥材1～2g，用1%碳酸氫鈉溶液40～50ml，超聲處理20～25分鐘，濾過(guò)，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30～40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖蓟蛞宜嵋阴?～2ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液，再取阿魏酸對(duì)照品，加乙醇或乙酸乙酯制成每1ml含1～1.2mg的溶液,作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各5～10μl、對(duì)照品溶液2～4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-三氯甲烷-冰醋酸為展開(kāi)劑，三組份的配比為6:1:0.5或6:2:0.8或6:1:1，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；

④續(xù)斷的薄層鑒別：取益腎補(bǔ)骨液30～40ml，加乙醚振搖提取2次，每次20～30ml，棄去乙醚液，水層用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30～40ml，合并正丁醇液，正丁醇液用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次30～40ml，棄去洗滌液，正丁醇液再用30～40ml的氨試液洗滌，棄去洗液。將正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖?～2ml使溶解，作為供試品溶液，另取續(xù)斷對(duì)照藥材1～1.5g，加甲醇或乙醇25～35ml，冷浸30分鐘，超聲處理30～40分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0～25ml使溶解，按照供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液，再取川續(xù)斷皂苷Ⅵ對(duì)照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含3～5mg的溶液作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液5～10μl、對(duì)照藥材溶液3～5μl、對(duì)照品溶液5～8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，三組份的配比為13:7:2或13:6:1，展開(kāi)，取出，晾干，噴以8～10%的磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；

（2）骨碎補(bǔ)的含量測(cè)定

①色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水-冰醋酸=30～35:69～64:1為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為284nm，理論板數(shù)按柚皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；

②對(duì)照品溶液的制備：取柚皮苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加70～80%乙醇制成每1ml含60～80μg的溶液，即得；

③供試品溶液的制備：精密量取益腎補(bǔ)骨液5～10ml，置100ml量瓶，加70～80%乙醇80ml，超聲處理20～30分鐘，放冷，加70～80%乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；

④測(cè)定：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5～10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，得數(shù)據(jù)，本品每1ml含骨碎補(bǔ)以柚皮苷計(jì)，不得少于0.20mg。