[發明專利]一種降解速率可控的微孔淀粉及其制備方法有效
| 申請號: | 201310698617.0 | 申請日: | 2013-12-18 |
| 公開(公告)號: | CN103710409A | 公開(公告)日: | 2014-04-09 |
| 發明(設計)人: | 范代娣;馬曉軒;段志廣;楊嬋媛;蒙俊樺;王琪凱 | 申請(專利權)人: | 西北大學 |
| 主分類號: | C12P19/14 | 分類號: | C12P19/14;C08B30/12 |
| 代理公司: | 西安新思維專利商標事務所有限公司 61114 | 代理人: | 李罡 |
| 地址: | 710068 *** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 降解 速率 可控 微孔 淀粉 及其 制備 方法 | ||
技術領域
????本發明屬于生物醫用材料領域,具體涉及一種降解速率可控的微孔淀粉及其制備方法。
背景技術
微孔淀粉又稱為多孔淀粉,是原淀粉顆粒經人工方法處理,即用鹽酸、淀粉酶適當水解后得到的多孔狀淀粉,是一種全新的變性淀粉。它具有較大的比表面積,一定條件下分散在水及其它溶劑中,仍能保持結構的完整性,因此具有良好的吸水、吸油性能,可作為香精、香料、風味物質、色素、藥劑及保健食品中功能成分的吸附載體,并且成本較低,可自然降解。它的優勢在于:⑴對物體吸附是一種物理方式;⑵具有較大的比孔容、比表面積和良好的吸附性(吸水能力);⑶堆積密度和顆粒密度小,結構疏松;⑷具有分子篩的作用。
類人膠原蛋白是將人體已知序列膠原蛋白的一段mRNA逆轉錄生成cDNA后,經過特定序列重復和修飾,轉化于大腸桿菌中,并經過高密度發酵、分離提取及純化而得。該蛋白從根本上解決了動物提取膠原蛋白的水不溶性和病毒隱患(瘋牛病、豬瘟疫、禽流感)等問題,具有良好的促新細胞形成和促上皮細胞、成纖維細胞生長功能,相比動物膠原蛋白更具有良好的生物相容性,免疫排異反應低。
發明內容
本發明的目的是提供一種使用安全性大幅度提高的降解速率可控的微孔淀粉及其制備方法。
本發明所采用的技術方案是:
一種降解速率可控的微孔淀粉的制備方法,其特征在于:
由以下步驟實現:
步驟一:配制質量分數為38~40%的玉米淀粉溶液;
步驟二:用稀酸對玉米淀粉漿溶液進行出孔預處理,置于50℃恒溫水浴鍋中;反應4h后加入緩沖液中和,離心洗滌,離心條件為3000r/min,?4℃,?10min,反復操作3次,移去上清;
步驟三:以每克干基玉米淀粉加入60國際單位α-淀粉酶的比例稱取α-淀粉酶,再按國際單位比α-淀粉酶:糖化酶=1:(1~5)的比例稱取糖化酶,將α-淀粉酶和糖化酶混合,加入步驟二得到的玉米淀粉漿溶液中,加入緩沖液調節pH至4.5~5.0,在恒溫攪拌器上反應,反應時間為18~22h,反應溫度為45~55℃;
步驟四:加堿中和,離心3~5次,轉速為3000r/min,?反應溫度為4℃,每次離心10min,棄上清,真空冷凍干燥機凍干,得微孔淀粉;
步驟五:將膠原蛋白與微孔淀粉按照(10~20):1的質量比,在50mL離心管中混合并加入交聯劑,于37℃恒溫培養箱中反應24~72h后取出洗滌,凍干,得降解速率可控的微孔淀粉。
步驟一中,所用玉米淀粉的分子量為7000~10000Da;
步驟一中,配制玉米淀粉溶液使用蒸餾水。
步驟二中,稀酸選取摩爾濃度為1.5~3.0mol/L的稀鹽酸;
步驟二中,緩沖液選取摩爾濃度為0.2mol/L的Na2HPO4溶液。
步驟三中,α-淀粉酶活度為5.0×104IU/g,糖化酶活度為1.0×105IU/g;
步驟三中,緩沖液由摩爾濃度為0.2mol/L的Na2HPO4溶液和摩爾濃度為0.1mol/L的檸檬酸溶液按體積比2:1的比例混合而成。
步驟四中,堿指摩爾濃度為1.5~2.0mol/L的NaOH溶液。
步驟五中,交聯劑為質量分數為0.05~0.2%的戊二醛溶液;
步驟五中,交聯反應體系的溶劑為體積分數為95%的乙醇;
步驟五中,膠原蛋白選取基因工程技術高密度發酵生產的人源型膠原蛋白。
所述的一種降解速率可控的微孔淀粉的制備方法制備的降解速率可控的微孔淀粉。
本發明具有以下優點:
本發明提供的一種降解速率可控的微孔淀粉,作為可生物降解組織工程用止血材料,具有適宜的微觀結構和孔隙率,具有優良的止血性能和可控的降解速率。當出血時,適于血細胞附著在材料表面形成一種凝膠狀混合物,從而達到止血的效果。與現有技術相比,該止血材料又具有其自身顯著的優點:免疫排異反應更低,而且徹底杜絕了膠原蛋白止血材料不可避免的病毒隱患,使用安全性大幅度提高。?
附圖說明
圖1為微孔淀粉掃描電鏡(SEM)。左側為微孔淀粉酶解后表面成孔情況,右側為與少量類人膠原蛋白交聯的微孔淀粉。
圖2為在兔子肝臟做出創面的照片。
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