[發(fā)明專利]一種非法添加止咳平喘類化學(xué)成分的液-質(zhì)多指標(biāo)快速檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310697329.3
• 申請(qǐng)日: 2013-12-18
• 公開（公告）號(hào): CN103760245A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳曉虎;秦劍;鄒江;王白露;任學(xué)毅;曾令高;蘇晶;梁靜;況剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶市食品藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 重慶輝騰律師事務(wù)所 50215
• 代理人: 武小赟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種保健食品和藥品中非法添加成分的快速檢測(cè)方法，更具體的說涉及一種非法添加止咳平喘類化學(xué)成分的液-質(zhì)多指標(biāo)快速檢測(cè)方法。

技術(shù)背景

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS)即液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)。這種技術(shù)的分離系統(tǒng)是液相色譜，而檢測(cè)系統(tǒng)則為質(zhì)譜，即利用色譜的分離技術(shù)，將混合樣品分離成單一的物質(zhì)，按順序進(jìn)入質(zhì)譜后，這些物質(zhì)被質(zhì)譜的質(zhì)量分析器打成碎片，由質(zhì)譜檢測(cè)器來分析物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，利用判斷鍵的斷裂方式，通過質(zhì)核比照相應(yīng)的對(duì)照?qǐng)D庫，判斷離子碎片的結(jié)構(gòu)，從而對(duì)未知樣品進(jìn)行定性定量。這種液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)體現(xiàn)出了色譜與質(zhì)譜的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，把色譜和質(zhì)譜的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來，讓人們?cè)诜治鲋心軌蚶盟鼈兊母叻蛛x力、高靈敏度和高選擇性等特點(diǎn)，再加上系統(tǒng)能夠提供對(duì)照譜圖，使得分析試驗(yàn)?zāi)軌蛟絹碓胶?jiǎn)便圓。液質(zhì)聯(lián)用為比較成熟的技術(shù)，在當(dāng)今許多領(lǐng)域如農(nóng)藥殘留分析、食品分析、環(huán)境分析與藥物分析等方面得到了廣泛的應(yīng)用。目前分析上常用的液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)基本從質(zhì)譜方向分為質(zhì)量分析器分類及離子源分類兩大類。質(zhì)量分析器分類包括四級(jí)桿、飛行時(shí)間(TOF)、傅立葉變換質(zhì)譜：離子源分類包括大氣壓化學(xué)電離源(APCI)、大氣壓光電離源(APPI)、電噴霧離子源(ESI)、基質(zhì)輔助激光解吸電離源(MALDI)。

與傳統(tǒng)液相色譜的檢測(cè)器，如UV或者PAD比較，質(zhì)譜具有靈敏度高和鑒定功能強(qiáng)等特點(diǎn)，加上液相色譜的分析范圍較廣，近年來液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已經(jīng)成為大型比賽中藥物分析方面最強(qiáng)有力的工具之一。尤其是近幾年對(duì)于各種藥物尤其是違禁藥物及其代謝產(chǎn)物的研究，國內(nèi)外都有大量的文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

但是由于針對(duì)某一種藥品或保健品可添加的同類化學(xué)成分非常多，如針對(duì)每一種成分逐一進(jìn)行檢測(cè)，不僅檢測(cè)成本巨大，同時(shí)需要大量的檢測(cè)時(shí)間，不利于提高工作效率；因此本發(fā)明提供了一種非法添加止咳平喘類化學(xué)成分的液-質(zhì)多指標(biāo)快速檢測(cè)方法。具體的操作步驟為：

1）取相當(dāng)于一次口服劑量的中成藥或保健食品（固體制劑需研細(xì)，液體制劑直接取樣），加甲醇25ml，超聲處理10分鐘，用微孔濾膜（0.45um）濾過，濾液用甲醇適當(dāng)稀釋，作為供試品溶液。

2）取茶堿、磺胺甲噁唑、氯苯那敏、苯海拉明、噴托維林、苯丙哌林、醋酸潑尼松、地西泮對(duì)照品適量，分別加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3）上機(jī)檢測(cè)：通過高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)樣品進(jìn)行篩查和鑒定。

高效液相色譜儀：waters?AQUITY?UPLC儀；

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱為WATERS?BEH?C₁₈，100mm×2.1mm，1.7μm）；

以含0.1%甲酸的甲醇為流動(dòng)相A,以含0.1%甲酸的10mmol/L的甲酸銨溶液為流動(dòng)相B，按下表1以進(jìn)行梯度洗脫；

表1HPLC梯度洗脫流動(dòng)相

流速：0.3ml/min；

柱溫：40℃；；

樣品溫度：15℃；

進(jìn)樣量：1ul；

飛行時(shí)間質(zhì)譜儀：waters?Q-TOF儀；

電噴霧電離子源（ESI）；

質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)：ESI+掃描；

干燥氣溫度：350℃；

錐孔電壓：35v；

掃描方式：一級(jí)質(zhì)譜全掃描、二級(jí)質(zhì)譜全掃描，掃描范圍：100～1000m/z；

4）鑒定：

供試品色譜中，出現(xiàn)與混合對(duì)照品中各對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜峰，并且供試品該色譜峰液質(zhì)聯(lián)用的一級(jí)質(zhì)譜及二級(jí)質(zhì)譜均與對(duì)照品一致，即判斷此供試品為陽性。

供試品色譜中，未出現(xiàn)與混合對(duì)照品中各對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜峰，即判斷此供試品為陰性。

本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：本發(fā)明建立了一種非法添加的止咳平喘類化學(xué)成分，的高效檢測(cè)方法，與單一指標(biāo)檢測(cè)項(xiàng)目，檢測(cè)限和專屬性均無顯著差異；且具有很高的檢測(cè)效率。

附圖說明

圖1對(duì)照品提取離子流色譜圖；

圖2對(duì)照品一級(jí)質(zhì)譜圖；

圖3對(duì)照品二級(jí)質(zhì)譜圖；

圖4陰性樣品（未檢出氯苯那敏）總離子流圖；

圖5陽性樣品（檢出氯苯那敏）總離子流圖；

圖6陽性樣品（檢出了氯苯那敏）提取離子流圖（275.132，0.02Da）；

圖7陽性樣品（檢出氯苯那敏）一級(jí)質(zhì)譜圖；

圖8陽性樣品（檢出氯苯那敏）二級(jí)質(zhì)譜圖；