[發(fā)明專利]DLK1基因在制備胃腸道間質(zhì)瘤診斷試劑中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310695517.2
• 申請日: 2013-12-17
• 公開（公告）號: CN104711341B
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張志剛;曹暉;徐佳;汪明
• 申請（專利權(quán)）人: 上海市腫瘤研究所
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/574
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

本發(fā)明涉及DLK1基因在制備胃腸道間質(zhì)瘤診斷試劑中的應(yīng)用。本發(fā)明的新發(fā)現(xiàn)可應(yīng)用于開發(fā)基于RT?PCR、PCR、免疫檢測、原位雜交、基因芯片等技術(shù)的診斷胃腸道間質(zhì)瘤的藥物或試劑盒。本發(fā)明首次提出利用基于血清/組織中DLK1基因及其產(chǎn)物的檢測來達(dá)到早期診斷GIST或?qū)邮苁中g(shù)治療的GIST患者進(jìn)行預(yù)后判斷，建立在基因水平上的高通量芯片篩選+實時定量PCR驗證和蛋白水平上的大樣本臨床樣本驗證，結(jié)果可靠，且DLK1無論是在基因水平還是蛋白水平上都能夠顯著區(qū)分腫瘤與非腫瘤、高危腫瘤與低危腫瘤，結(jié)果的重復(fù)性好，具有較好的臨床應(yīng)用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域；更具體地，本發(fā)明涉及DLK1基因在制備胃腸道間質(zhì)瘤診斷試劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

胃腸道間質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumor，GIST)是胃腸道最常見的間葉來源腫瘤，主要發(fā)生于胃(約占70%)。近年來GIST的發(fā)病率有逐年較快增加的趨勢，以前流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示其發(fā)病率約為7-15/百萬人/年，近年來國內(nèi)外流行病學(xué)統(tǒng)計GIST發(fā)病率超過20/百萬人/年。2009年中國流行病學(xué)調(diào)查資料顯示其發(fā)病率達(dá)到約30/百萬人/年。據(jù)推算，國內(nèi)每年的新發(fā)病例數(shù)可達(dá)4-5萬例左右。GIST儼然已成為消化道內(nèi)僅次于胃癌、腸癌的常見的惡性腫瘤。

GIST大多起源于胃腸道粘膜下，向腔內(nèi)外突出生長，因而早期并無特殊癥狀，大多數(shù)患者是在腫瘤生長到一定階段，出現(xiàn)消化道出血或發(fā)現(xiàn)腹部腫塊才來就診，甚至有不少患者直到腫瘤破潰穿孔甚至腹腔內(nèi)廣泛破散才能得到診斷，導(dǎo)致錯失最佳治療時機(jī)。由于GIST起病部位隱匿，給早期診斷帶來困難，向腔外突出為主的胃GIST在內(nèi)鏡檢查中較易漏診，即使內(nèi)鏡下發(fā)現(xiàn)病灶，由于病灶深度的原因，大多不能像上皮源性腫瘤一樣取得明確的病理診斷；小腸或胃腸道外GIST的診斷至今仍是困擾臨床醫(yī)師的一大難題，幾乎沒有可靠的影像學(xué)診斷手段，甚至往往需要行剖腹探查才能實現(xiàn)診斷。癌胚抗原(CEA)應(yīng)用于大腸癌的早期診斷或甲胎蛋白應(yīng)用于肝癌的篩選已經(jīng)取得了成功，而相較于其他腫瘤，起病隱匿診斷困難的GIST更需要一種簡單可行的生物學(xué)標(biāo)志物來應(yīng)用于臨床診斷。GIST的生物學(xué)行為多樣，跨度覆蓋良性、低度惡性、中度惡性、高度惡性。絕大多數(shù)體積很小的GIST可以終生隨訪而無任何進(jìn)展。高度惡性病例預(yù)后極差，生長極快，在靶向治療藥物伊馬替尼問世之前，其中位生存期僅有10-20個月，5年生存率<10%。同時GIST的生物學(xué)行為較難預(yù)測，雖然目前有普遍被接受的NIH(National Institutes of Health美國國立衛(wèi)生研究院)危險度分級(主要依據(jù)腫瘤大小、核分裂相以及腫瘤原發(fā)部位)，但是臨床上也有不少病例的病程發(fā)展較難用上述分級標(biāo)準(zhǔn)來解釋。甚至有文獻(xiàn)報道一些看似“良性的GIST”，即腫瘤直徑＜2cm，核分裂相＜5/50HFP的腫瘤患者，術(shù)后短期內(nèi)發(fā)生復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移；也不乏腫瘤巨大的患者在接受手術(shù)治療后即使不接受藥物治療也能獲得長期生存。

小分子酪氨酸激酶受體抑制劑甲磺酸伊馬替尼的問世極大地改變了GIST的治療策略，該藥物以GIST發(fā)病的最根本分子異常(c-kit基因突變)為治療靶點(diǎn)，發(fā)揮有效的抗腫瘤的作用。然而在靶向藥物治療應(yīng)用的臨床實踐中也出現(xiàn)了一些問題：(1)約有5-10%的患者對伊馬替尼原發(fā)耐藥，而大多數(shù)對伊馬替尼初始治療有效的患者最終會不可避免地發(fā)展為激發(fā)耐藥，耐藥多發(fā)生于初始治療開始后6個月至2年內(nèi)；(2)目前高復(fù)發(fā)風(fēng)險GIST患者手術(shù)后接受一定時間的伊馬替尼輔助治療已經(jīng)取得共識，然而輔助治療合適的人群選擇始終存在爭議，放寬治療適應(yīng)癥必然會帶來醫(yī)療資源的浪費(fèi)，增加耐藥的發(fā)生；過度嚴(yán)苛的適應(yīng)癥也會導(dǎo)致一部分患者錯過理應(yīng)接受的合理治療；(3)伊馬替尼不菲的價格使很多患者對其望而卻步，如果能夠有更客觀合理判斷GIST患者復(fù)發(fā)風(fēng)險的指標(biāo)，將能極大地有利于醫(yī)療資源的合理分配。

因此，臨床上亟待一種能夠有效判斷GIST預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供DLK1基因在制備胃腸道間質(zhì)瘤診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用。