[發明專利]一種具有腫瘤靶向性的非病毒陽離子基因載體及其制備方法

有效

• 申請號: 201310694680.7
• 申請日: 2013-12-17
• 公開（公告）號: CN103695449A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 李劍光;楊爽;滕樂生;滕利榮;孟慶繁;逯家輝;謝晶;王迪;王貞佐;劉艷;程瑛琨;權宇彤
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 張景林;王恩遠

1.一種具有腫瘤靶向性的非病毒陽離子基因載體FA-PEI-OA，其特征在于：是由聚醚酰亞胺PEI、油酰氯OA和葉酸FA制備得到，交聯的陽離子聚合物聚醚酰亞胺-油酰氯PEI-OA形成疏水性核心結構，由具有腫瘤靶向性的配體葉酸FA作為外殼，PEI與OA的摩爾比為1:1～4:1，PEI-OA與FA的摩爾比為1:1～20:1。

2.權利要求1所述的具有腫瘤靶向性的非病毒陽離子基因載體FA-PEI-OA的制備方法，其步驟如下：

（1）PEI-OA的合成：將聚醚酰亞胺溶于二氯甲烷中，濃度范圍為0.5～5mg·mL^-1；將油酰氯溶解于三乙胺和二氯甲烷的混合溶液中，三乙胺和二氯甲烷的體積比為2:1～8:1，油酰氯的濃度范圍為0.2～2mg·mL^-1，按照聚醚酰亞胺與油酰氯摩爾比為1:1～4:1比例，將油酰氯溶液緩慢地加入到聚醚酰亞胺溶液中，并室溫攪拌，控制攪拌轉速為100～500rpm，反應進行6～24h，通過透析除去過量的三乙胺，最后通過真空干燥得到PEI-OA粉末；

（2）將步驟（1）得到的PEI-OA粉末使用溶劑溶解后，在DEPC水、PB緩沖液或PBS緩沖液體系中與pH=6～8的葉酸溶液均勻混合，PEI-OA與葉酸的摩爾比為1:1～20:1，通過靜電吸附作用制得FA-PEI-OA基因載體。

3.如權利要求2所述的具有腫瘤靶向性的非病毒陽離子基因載體FA-PEI-OA的制備方法，其特征在于：PEI的分子量為800～2000Da。

4.如權利要求2所述的具有腫瘤靶向性的非病毒陽離子基因載體FA-PEI-OA的制備方法，其特征在于：步驟（1）中透析截留分子量為10～30K，透析時間為8～24h。

5.如權利要求2所述的具有腫瘤靶向性的非病毒陽離子基因載體FA-PEI-OA的制備方法，其特征在于：步驟（2）中的溶劑為無水乙醇或氯仿。