[發明專利]一種從雷公藤提取物中快速制備雷公藤紅素化學對照品的方法

無效

• 申請號: 201310691196.9
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN104710501A
• 公開（公告）日: 2015-06-17
• 發明（設計）人: 肖紅斌;洪志來;高明哲;卓榮杰
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 劉陽

1.高效制備高純的雷公藤紅素化學對照品的方法，其特征在于：雷公藤藥材經乙醇提取，乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析、高效制備色譜分離和凝膠純化，可獲得純度大于98%的雷公藤紅素化學對照品。本發明步驟為：

1）提取與萃取：

雷公藤藥材，經乙醇提取，濃縮干燥后得到的總浸膏用水分散，得到總懸浮液；再將總懸浮液用乙酸乙酯萃取，濃縮干燥得乙酸乙酯萃取部位；

2）硅膠柱層析分離：

將步驟1）中所得的乙酸乙酯萃取部位進行硅膠柱層析分離，石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，洗脫液濃縮干燥得雷公藤紅素組分；

3）制備高效液相色譜純化：

將步驟2）中所得的雷公藤紅素組分用甲醇溶解，微孔濾膜過濾，即為供試品；將供試品用反相高效制備色譜分離，以甲醇-水溶液為洗脫體系，紫外檢測器監測，收集雷公藤紅素的色譜峰，流份濃縮干燥后得到雷公藤紅素粗產物；

4）凝膠純化

將步驟3）中所得的雷公藤紅素粗產物用甲醇溶解，經甲醇凝膠柱純化，得到純度大于98%雷公藤紅素對照品。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1）中提取時乙醇溶液的體積濃度為80%-100%。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1）中分散時用的水的體積為總浸膏的4-5倍，萃取用的乙酸乙酯與總懸浮液的體積相同。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟2）中石油醚和乙酸乙酯的體積比例為4:1-1:1。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟2）中采用薄層色譜做指導收集流份，展開劑為石油醚-乙酸乙酯，石油醚-乙酸乙酯體積比為2:1，收集Rf值為0.4-0.6的洗脫物。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3）中供試品溶液配置中，雷公藤紅素組分濃度為50-150mg/mL。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3）中反相高效液相制備色譜的流動相中，甲醇的體積分數為80%-90%，用甲酸調節至pH=4。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3）反相高效液相制備中進樣體積為5-10mL，流速控制在80-180mL/min。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3）反相高效液相制備中采用275-425nm監測。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟4）純化用的凝膠為Sephadex?LH-20。