[發(fā)明專利]一株高產(chǎn)1,3-丙二醇的微生物有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310688092.2 | 申請(qǐng)日： | 2013-12-16 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103740609A | 公開(kāi)（公告）日： | 2014-04-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 劉德華;歐先金;孫燕 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 清華大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N1/20 | 分類號(hào)： | C12N1/20;C12P7/18;C12M1/00;C12M1/34;C12R1/22 |
| 代理公司： | 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 李志東 |
| 地址： | 100084 北京*** | 國(guó)省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說(shuō)明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 高產(chǎn) 丙二醇 微生物 | ||
1.一種分離的微生物，其于2013年7月11日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC?NO.7824，保藏名稱為ACR30。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離的微生物，所述微生物為克雷伯肺炎桿菌。
3.一種生產(chǎn)PDO的方法，其特征在于，包括：
于37攝氏度，150rpm條件下，利用種子培養(yǎng)基將權(quán)利要求1或2所述的分離的微生物進(jìn)行培養(yǎng)，以便獲得種子培養(yǎng)液；以及
于37攝氏度，150-250rpm，空氣0.5vvm條件下，利用發(fā)酵培養(yǎng)基將所述種子培養(yǎng)液進(jìn)行發(fā)酵罐培養(yǎng)，并使發(fā)酵液的pH保持為6.8，以便生產(chǎn)所述PDO，
其中，
1L所述種子培養(yǎng)基中包含：
2g硫酸銨；
6.9g三水磷酸氫二鉀；
2.5g磷酸二氫鉀；
0.2g硫酸鎂；
1g酵母粉；
30g甘油；
2.0mL微量元素溶液；以及
1.0mL鐵溶液，
1L所述發(fā)酵培養(yǎng)基中包含：
4g硫酸銨；
0.69g三水磷酸氫二鉀；
0.25g磷酸二氫鉀；
0.2g硫酸鎂；
1.5g酵母粉；
30g甘油；
1.5mL微量元素溶液；以及
1.5mL鐵溶液，
每100mL所述種子培養(yǎng)基中接入所述分離的微生物的斜面菌苔1～5環(huán)，
所述種子培養(yǎng)液與所述發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1:100。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，進(jìn)行所述培養(yǎng)12小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，于搖瓶或發(fā)酵罐中進(jìn)行所述發(fā)酵培養(yǎng)，
任選地，將所述搖瓶置于150rpm的搖床中進(jìn)行所述發(fā)酵培養(yǎng)，
任選地，于所述發(fā)酵罐中進(jìn)行所述發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)，維持250rpm的攪拌轉(zhuǎn)度，
任選地，向所述發(fā)酵液中流加濃度為40%的NaOH，以便使所述發(fā)酵液的pH保持為6.8。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，1L所述微量元素溶液中包含：
100mg四水硫酸錳；
80mg氯化鋅；
40mg二水鉬酸鈉；
60mg硼酸；
300mg六水氯化鈷；
30mg五水硫酸銅；
25mg六水氯化鎳；以及
0.9mL濃度為37%的濃鹽酸，
任選地，1L所述鐵溶液中包含：
5.0g?FeSO4·H2O；以及
4mL濃度為37%的濃鹽酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，進(jìn)一步包括：
對(duì)所述PDO進(jìn)行定量定性分析，優(yōu)選采用高效液相色譜儀進(jìn)行所述定量定性分析。
8.一種生產(chǎn)PDO的系統(tǒng)，其特征在于，包括：
種子培養(yǎng)裝置，所述種子培養(yǎng)裝置用于在37攝氏度，150rpm條件下，利用種子培養(yǎng)基將權(quán)利要求1或2所述的分離的微生物進(jìn)行培養(yǎng)12小時(shí)，獲得種子培養(yǎng)液；以及
發(fā)酵培養(yǎng)裝置，所述發(fā)酵培養(yǎng)裝置與所述種子培養(yǎng)裝置相連，用于在37攝氏度，150-250rpm，空氣0.5vvm條件下，利用發(fā)酵培養(yǎng)基將所述種子培養(yǎng)液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，并使發(fā)酵液的pH保持為6.8，以便生產(chǎn)所述PDO，
其中，
1L所述種子培養(yǎng)基中包含：
2g硫酸銨；
6.9g三水磷酸氫二鉀；
2.5g磷酸二氫鉀；
0.2g硫酸鎂；
1g酵母粉；
30g甘油；
2.0mL微量元素溶液；以及
1.0mL鐵溶液，
1L所述發(fā)酵培養(yǎng)基中包含：
4g硫酸銨；
0.69g三水磷酸氫二鉀；
0.25g磷酸二氫鉀；
0.2g硫酸鎂；
1.5g酵母粉；
20-50g甘油；
1.5mL微量元素溶液；以及
1.5mL鐵溶液，
所述種子培養(yǎng)液與所述發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1:100。
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