[發明專利]Tween型親水作用色譜固定相及其合成和應用

在審

• 申請號: 201310683617.3
• 申請日: 2013-12-10
• 公開（公告）號: CN104689805A
• 公開（公告）日: 2015-06-10
• 發明（設計）人: 肖紅斌;用天;萬伯順
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: B01J20/281
• 分類號: B01J20/281;B01J20/30;B01D15/08
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

技術領域

本發明涉及Tween類親水作用色譜固定相的設計。?

本發明還涉及上述固定相的制備方法。?

本發明還涉及上述固定相在親水作用色譜中的應用。?

背景技術

在傳統的液相色譜分離模式中，采用C8/C18固定相的反相色譜最常用，它可以滿足絕大多數色譜分離的需求，但是反相色譜難于分離強極性化合物，因為這類極性化合物在C8/C18固定相上的保留極弱，往往在死時間出峰。為了解決這類強極性化合物的液相分離問題，親水作用色譜應運而生[文獻1：D.García-Gómez,E.Rodríguez-Gonzalo,R.Carabias-Martínez,Trends?Anal.Chem,47(2013)111.文獻2：P.Jandera,Anal.Chim.Acta692(2011)1.文獻3：Y.Guo,S.Gaiki,J.Chromatogr.A1218(2011)5920.文獻4：M.R.Gama,R.G.da?Costa?Silva,C.H.Collins,C.B.G.Bottoli,Trends?Anal.Chem.37(2012)48.文獻5：Y.Yang,X.D.Geng,J.Chromatogr.A1218(2011)8813.]。親水作用色譜可以說是正相色譜和反相色譜的結合，它一般使用極性固定相和有機溶劑/水二元流動相，對極性化合物和水溶性化合物都有強保留。目前已有成熟的商品化的親水作用色譜固定相在市面上銷售，根據其鍵合基團的結構可分為醇型、胺型、兩性離子型、氰基型、多糖型和純硅膠型等等。但是，由于實際樣品的復雜性和分離要求的多樣性，目前還沒有一種親水作用色譜能夠滿足大部分極性化合物分離的需求，因此開發新型親水作用色譜固定相是一項十分重要的工作。聚乙二醇柱（PEG柱）是一種已經商品化的親水作用色譜柱，這種色譜柱主要利用了聚乙二醇基團的親水性來實現色譜分離，但是其存在親水性不足的缺點，而且脂肪鏈堆積出的疏水作用過強，使其表現出親水作用色譜和反相色譜混合模式的特點，均不利于其在親水作用色譜模式中的應用[文獻6：P.Jander,T.Hájek,J.Sep.Sci.32(2009)3603.文獻7：E.Blahová,P.Jandera,F.Cacciola,L.Mondello,J.Sep.Sci.29(2006)555.]。Tween是一種非離子型表面活性劑,廣泛作為吸附劑和添加劑使用，應用于分離和富集極性化合物，如多肽等。考慮其結構中的聚乙二醇鏈較短而羥基較多，可以提供優于聚乙二醇的良好的親水作用位點，而且酯基上的長鏈脂肪基團可提供疏水作用等適量的其他分子作用以改善分離選擇性，因此Tween是非常適合作親水作用色譜固定相的鍵合修飾基團。?

發明內容

本發明涉Tween類親水作用色譜固定相的設計合成及其應用。?

已合成出的Tween類親水作用色譜固定相如下式所示:?

該類固定相的鍵合基團為Tween基團，含有硅膠基質，氨基甲酸酯鍵橋和Tween基三個部分，硅膠基質和Tween基通過氨基甲酸酯鍵橋相連接，氨基甲酸酯鍵橋和硅膠之間相隔三個碳，Tween基和氨基甲酸酯鍵橋通過酯鍵相連。?

Tween為Tween20、Tween40、Tween60或Tween80；?

其制備過程如下：?

（1）將1體積Tween溶于5體積無水甲苯中，于80℃下，通過滴液漏斗向上述溶液中滴加等當量的硅烷試劑(EtO)₃SiCH₂CH₂CH₂NCO，滴加完成后繼續反應6-8h；?

（2）將（1）中反應所得溶液加入6當量干燥硅膠和催化量的無水吡啶，回流反應24h;?

（3）冷卻后，過濾，固體產物依次用大量甲苯，乙醇，水，乙醇和丙酮洗，再于60-80℃下真空干燥6-10h即得目標固定相。?

所述的色譜固定相可應用在親水作用色譜中。?

本發明所具有的優點?

此類親水作用色譜固定相合成簡單，在親水作用色譜中分離極性和水溶性有機化合物時具有較好的分離特性（柱效高，峰對稱性好，選擇性優，穩定性和重復性好）,未來有望在親水作用色譜中得到廣泛應用。?

附圖說明

圖1為已合成的四種Tween柱分離五種水溶性vitamin的色譜圖；?

圖2為已合成的四種Tween柱分離十種堿基和核苷的色譜圖；?