[發明專利]一種建立急性病毒性肝炎動物模型的方法

在審

• 申請號: 201310683346.1
• 申請日: 2013-12-12
• 公開（公告）號: CN104706657A
• 公開（公告）日: 2015-06-17
• 發明（設計）人: 萬曉春;田永帥;陳鳳蓮
• 申請（專利權）人: 中國科學院深圳先進技術研究院
• 主分類號: A61K31/787
• 分類號: A61K31/787;A61K31/7008
• 代理公司: 深圳市科進知識產權代理事務所(普通合伙) 44316
• 代理人: 沈祖鋒;郝明琴

1.一種建立急性病毒性肝炎動物模型的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：從純系小白鼠、純系B6小鼠、純系嚴重聯合免疫缺陷病小鼠、純系裸鼠或純系分化抗原1d缺陷小鼠中選擇至少一組小鼠；

步驟2：用無菌磷酸緩沖溶液配制D-氨基半乳糖溶液，用無菌磷酸緩沖溶液配制多聚肌苷酸:多聚胞苷酸溶液；

步驟3：對步驟1所選的每組純系小鼠分別注射D-氨基半乳糖溶液和多聚肌苷酸:多聚胞苷酸溶液，其中，D-氨基半乳糖每克體重劑量范圍是0.15～0.5mg，多聚肌苷酸:多聚胞苷酸每克體重劑量范圍是0.03～0.5μg；

步驟4：D-氨基半乳糖溶液和多聚肌苷酸:多聚胞苷酸溶液腹腔注射或靜脈注射后6～24小時，收集血液后分離血清，檢測血清丙氨酸氨基轉移酶活性，結果為300～800U/L，則急性病毒性肝炎動物模型建立成功。

2.根據權利要求1所述的建立急性病毒性肝炎動物模型的方法，其特征在于，所述步驟1中所選的為6～8周齡的純系小白鼠。

3.根據權利要求1所述的建立急性病毒性肝炎動物模型的方法，其特征在于，所述步驟2中的D-氨基半乳糖溶液終濃度為15～30μg/μl，多聚肌苷酸:多聚胞苷酸溶液終濃度為5～10ng/μl。

4.根據權利要求3所述的建立急性病毒性肝炎動物模型的方法，其特征在于，所述步驟3中D-氨基半乳糖每克體重劑量是0.5mg，多聚肌苷酸:多聚胞苷酸每克體重劑量范圍是0.03μg。

5.根據權利要求1所述的建立急性病毒性肝炎動物模型的方法，其特征在于，所述步驟4收集血清的時間為D-氨基半乳糖溶液和多聚肌苷酸:多聚胞苷酸溶液注射后12～18小時。

6.根據權利要求1所述的建立急性病毒性肝炎動物模型的方法，其特征在于，所述步驟4除檢測血清丙氨酸轉移酶活性外還包括檢測血清天冬氨酸轉移酶活性；以及收集小鼠肝臟標本，顯微鏡下觀察肝臟組織學變化；血清丙氨酸氨基轉移酶活性和天冬氨酸轉移酶活性均為300～800U/L，肝臟組織學出現肝細胞點狀壞死，則急性病毒性肝炎動物模型建立成功。

7.根據權利要求1所述的建立急性病毒性肝炎動物模型的方法，其特征在于，所述步驟4中D-氨基半乳糖溶液的注射方式為腹腔注射，多聚肌苷酸:多聚胞苷酸溶液的注射方式為尾靜脈注射。