[發明專利]中和抗艱難梭菌毒素IgY的口服結腸定位制劑

有效

• 申請號: 201310683057.1
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN103690948A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 馮東曉;邢平平;張淑敏;劉紅;劉楓;王曉玉
• 申請（專利權）人: 山東國際生物科技園發展有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61K9/30;A61P31/04;A61P1/12
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明涉及一種治療艱難梭菌相關性腹瀉的藥物制劑，具體地，是以針對艱難梭菌感染的IgY為活性成分制備而成的微丸制劑，屬于藥物制劑領域。?

背景技術

艱難梭菌感染已經成為一個重大的醫療問題。它代表了醫院抗生素相關性腹瀉和偽膜性結腸炎的主導病因。據估計，在美國每年艱難梭菌感染總數超過750,000個病例，并且它所導致的死亡超過所有其他腸道感染之和。在許多醫院艱難梭菌對患者構成的風險比耐甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌或其他任何細菌更大。艱難梭菌感染的治療策略最常用的方法是口服甲硝唑（每天三次或四次，每次250至500mg）或萬古霉素（每天四次，每次125mg），由于抗生素導致結腸菌群的紊亂，最近暴發的毒力或抗生素耐藥性增加的艱難梭菌菌株已經導致治療失敗、復發更頻繁以及死亡率增加，而艱難梭菌抗體通過中和胃腸道中的艱難梭菌毒素的作用來防止，這種療法沒有危險的副作用，而且可安全用藥。采用艱難梭菌菌體、純化的毒素蛋白或重組毒素經甲醛處理后免疫母雞，得到蛋黃免疫球蛋白IgY，經純化后，口服治療艱難梭菌感染。這類疫苗的優點是不僅可以預防，還可以作為治療藥物。?

IgY（IgY）是從經抗原免疫的禽類所產卵中分離的具有特異性的蛋白，它具有產率高、穩定性好、特異性強等優點，是一種易于生產、廉價的抗體，免疫1只雞所收集到的僅1個雞蛋中含有的IgY的量（約200mg）遠遠高于免疫1只兔子所收集到的全部血清中的抗體量。目前，IgY在畜牧業上已經得到較廣泛的關注和應用，高效IgY可以通過注射、拌餌投喂、浸泡等方式對水產動物起到疾病治療作用，還可用于免疫學檢測等領域。?

艱難梭菌感染目前以抗生素療法為主要手段，隨著菌株毒力的增強和對抗生素產生耐藥性的新菌株的產生，需探索新的治療方法，而針對艱難梭菌毒素A和毒素B的抗體作為預防艱難梭菌感染成為主要的研究方向。IgY由于化學性質穩定、產量高、成本低以及動物種系發生學距離的優勢日益成為醫藥領域的新熱?點，用特異性IgY治療腹瀉等胃腸道疾病這一成果已經在獸醫學中獲得應用，不少人用IgY藥物臨床前和臨床研究也正在開展，具有廣闊的應用前景。用針對艱難梭菌感染的IgY作為治療艱難梭菌感染的手段成為我們探索的目標，該感染主要發病于結腸，通過考察IgY的性質以及利用口服結腸定位給藥系統的理論，我們的目標是將抗艱難梭菌感染的IgY制備成口服結腸定位制劑。?

口服結腸定位釋藥系統是指用適當的方法，使藥物口服后避免在胃、十二指腸、空腸和回腸前端釋放藥物，運送到回盲腸部后釋放藥物而發揮局部和全身治療作用的一種給藥系統，是一種定位在結腸釋藥的制劑。近年來，這種給藥系統普遍受到關注，人們逐漸認識到結腸在藥物吸收及局部治療方面所體現的優勢，與胃和小腸的生理環境比較，結腸的轉運時間較長，而且酶的活性較低，因此藥物的吸收增加，特別是對于多肽類藥物，降解的可能性大大降低，這種生理環境對結腸定位釋藥和發揮治療作用非常有利。?

然而，雖然IgY具有較強的耐酸、耐堿、耐熱能力，但如何制備一種能夠維持中和抗艱難梭菌毒素IgY的長期穩定性和活性的口服結腸定位制劑仍然是本領域尚待解決的技術問題。?

發明內容

專利（CN201210568057.2）“艱難梭菌外毒素A羧基端序列密碼子優化基因片段、表達載體構建方法及其表達蛋白的應用”中提供了毒素A蛋白，同時專利（CN201310247870.4）“在大腸桿菌中高效表達的艱難梭菌外毒素B羧基端蛋白基因”中提供了毒素B蛋白，本發明用上述毒素A和毒素B蛋白免疫產蛋雞獲得抗艱難梭菌感染IgY，ELISA檢測其效價，家兔腸袢實驗進一步證明抗體的保護活性，提供了有抗艱難梭菌感染活性的IgY。?

本發明提供一種中和抗艱難梭菌毒素IgY的口服結腸定位制劑，其特征在于所述的定位制劑是包衣微丸，其中該微丸膠囊通過如下制備方法制備得到，?

(1)活性藥物丸芯的制備?

取50重量份中和抗艱難梭菌毒素IgY，占中和抗艱難梭菌毒素IgY成分15-25%重量的滑石粉，用水配成粘度適中的含藥溶液，取80-120重量份空白微晶纖維素（MCC）丸芯（粒徑0.7-0.8mm），用流化床包衣法制備活性藥物載藥丸?芯；?

(2)腸溶包衣?

取有結腸溶解功能的包衣材料EudragitS1008-10重量份，占包衣材料聚合物含量15-25%重量的檸檬酸三乙酯和占包衣材料聚合物含量8-15%重量的滑石粉，加水或者95%乙醇水至配置成尤特奇水分散體包衣液，用流化床包衣法制備包衣微丸。?