[發(fā)明專利]一株可以還原制備納米銀的解淀粉芽孢桿菌

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310682200.5
• 申請(qǐng)日: 2013-12-13
• 公開（公告）號(hào): CN103627664A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張杰;王濱松;張映;王嬌;熊文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 侯靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株解淀粉芽孢桿菌。

背景技術(shù)

納米銀因呈現(xiàn)出不同于普通材料的光、電、磁、熱力學(xué)和化學(xué)反應(yīng)等方面的奇異性能，被廣泛應(yīng)用在化工、醫(yī)藥、抗菌、冶金、航空、航天、電子等領(lǐng)域。納米銀主要由化學(xué)方法合成，不足之處在于合成成本高、所需能耗大和易吸附有機(jī)溶劑等，這就限制了納米銀在醫(yī)藥方面的應(yīng)用。因此，納米銀生物合成法因其成本低廉、條件溫和和環(huán)境友好等優(yōu)勢(shì)引起了人們廣泛的關(guān)注。

近年來(lái)，細(xì)菌、放線菌、真菌和植物提取物等都被用來(lái)用來(lái)合成納米銀，細(xì)菌因便于基因操作，可以使用基因工程技術(shù)使特定的還原酶活其穩(wěn)定作用的蛋白過(guò)量表達(dá)，，在制備納米銀方面有很大的優(yōu)勢(shì)。目前，細(xì)菌還原制備納米銀多采用細(xì)菌的培養(yǎng)上清液和菌體浸泡液，都屬于胞外液間歇式生產(chǎn)納米銀的過(guò)程，限制了納米銀的產(chǎn)量。因此，尋找能在生長(zhǎng)培養(yǎng)過(guò)程中胞外合成納米銀的細(xì)菌菌株并應(yīng)用于連續(xù)生產(chǎn)納米銀是提高納米銀產(chǎn)量的關(guān)鍵問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一株可以還原制備納米銀的解淀粉芽孢桿菌，為連續(xù)生產(chǎn)納米銀提供菌源。

一株可以還原制備納米銀的解淀粉芽孢桿菌，它為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01，屬于芽孢桿菌屬（Bacillus），已在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏編號(hào)為CGMCC?No.8464，保藏日期為2013年11月11日，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰路1號(hào)院3號(hào)。

解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01，菌株的形態(tài)特征：它為桿菌，長(zhǎng)1.5～1.8μm，寬0.3～0.4μm，有中生芽孢，無(wú)鞭毛，無(wú)莢膜，生長(zhǎng)菌落為圓形，表面粗糙不透明，邊緣不整齊。

解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01，菌株的生理生化特征：它為革蘭氏陽(yáng)性菌，過(guò)氧化氫酶接觸實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，酪素水解、淀粉水解、明膠水解、尿素水解陽(yáng)性，葡萄糖、蔗糖、甘露糖、果糖實(shí)驗(yàn)均產(chǎn)酸，D-木糖、L-阿拉伯糖、蜜二糖、麥芽糖、山梨醇、肌醇、甘露醇、乳糖、鼠李糖實(shí)驗(yàn)不產(chǎn)酸，硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)、伏普實(shí)驗(yàn)、檸檬酸鹽實(shí)驗(yàn)、馬尿酸實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，苯丙氨酸實(shí)驗(yàn)陰性。

解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01，菌株的分子生物學(xué)鑒定結(jié)果：它的16srDNA序列在GenBank的注冊(cè)號(hào)是KF700242，利用BLAST搜索與所得到的序列相似性高的序列，該菌的序列與解淀粉芽孢桿菌dhs-28的相似性達(dá)到99%，通過(guò)MEGA軟件構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，如圖3所示，結(jié)合其形態(tài)鑒定及生理生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定該菌是解淀粉芽孢桿菌；但是傳統(tǒng)的解淀粉芽孢桿菌可以利用麥芽糖和L-阿拉伯糖產(chǎn)酸，而該菌株不可以利用這兩種糖，說(shuō)明該菌株是解淀粉芽孢桿菌的一個(gè)新種。

本發(fā)明一株可以還原制備納米銀的解淀粉芽孢桿菌，它為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01，屬于芽孢桿菌屬（Bacillus），已在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏編號(hào)為CGMCC?No.8464，保藏日期為2013年11月11日，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰路1號(hào)院3號(hào)。

本發(fā)明一株可以還原制備納米銀的解淀粉芽孢桿菌，它在含有硝酸銀的LB培養(yǎng)基生長(zhǎng)培養(yǎng)中胞外合成納米銀，能夠通過(guò)連續(xù)添加含有硝酸銀的培養(yǎng)基來(lái)連續(xù)合成納米銀，為連續(xù)生產(chǎn)納米銀提供菌源，實(shí)現(xiàn)了利用發(fā)酵原理連續(xù)大量合成納米銀。

附圖說(shuō)明

圖1為具體實(shí)施方式一中解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01的透射電鏡圖；

圖2為具體實(shí)施方式一中解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01的PCR的擴(kuò)增電泳圖；

圖3為具體實(shí)施方式一中解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01的系統(tǒng)進(jìn)化樹圖；

圖4為具體實(shí)施方式一中解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloli?quefaciens）zxw01合成納米銀的電鏡圖。

具體實(shí)施方式