[發明專利]一種含中性蛋白酶的飼料復合酶及其制備方法

有效

• 申請號: 201310682190.5
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN103859169A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 李洪兵;李貴駿;楊中秋;孫霞;王章林;王永蘭
• 申請（專利權）人: 湖南鴻鷹生物科技有限公司
• 主分類號: A23K1/165
• 分類號: A23K1/165
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種含中性蛋白酶的飼料復合酶，由以下重量份數的酶制劑組成：濃縮麥芽酶30-40份，酸性蛋白酶20-30份，中性蛋白酶20-30份，酸性木聚糖酶20-30份，纖維素酶20-30份，β-葡聚糖酶15-20份，果膠酶15-20份，淀粉酶15-20份，甘露糖酶10-15份，植酸酶10-15份，中草藥提取物10-15份，保護劑10-15份，激活劑10-15份；

所述中性蛋白酶的制備方法如下：枯草芽孢桿菌1398-2-12經菌種活化和逐級擴大培養獲得液體種子；將液體種子以6%接種量接入發酵罐，培養溫度30-36℃，攪拌速度200-700r/m，通風量（V/V）1:1-3,培養時間10-15h；然后以1-2℃/h降溫速率緩慢降溫至10-15℃，恒溫培養15-20h；繼續以1-2℃/h降溫速率緩慢降溫至2-5℃，此時，將液體種子以4%接種量追加接入發酵罐，恒溫培養20-30h；最后以1-2℃/h升溫速率緩慢升溫至10-15℃，恒溫培養15-20h；繼續以1-2℃/h升溫速率緩慢升溫至30-36℃，恒溫培養15-20h；發酵液經過濾、濃縮、調配、精濾、干燥得固體中性蛋白酶；所述調配過程加入濃縮酶液總重量0.5-5%中草藥粉劑。

2.如權利要求1所述的一種含中性蛋白酶的飼料復合酶，其特征在于，制備中性蛋白酶的斜面培養基組成為：牛肉膏3-10g，氯化鈉5-12g，蛋白胨10-20g，葡萄糖2-5g,(NH)₂SO₄3-5g，K₂HPO₄6-8g，CaCl₂1-3g，瓊脂15-20g，中草藥粉劑5-10g，蒸餾水l000mL，pH值7.0-7.2。

3.如權利要求1所述的一種含中性蛋白酶的飼料復合酶，其特征在于，制備中性蛋白酶的種子培養基重量百分比組成為：酵母粉0.3-0.5%，葡萄糖1-1.5%，蛋白胨0.3-0.5%，牛肉膏0.5-0.8%，磷酸氫二鉀0.8-1.5%，中草藥粉劑1.5-2%，海藻糖1-3%，硫酸鈣1g,氯化鎂2g,檸檬酸鈉1-3g，不足部分純凈水補足，pH值7.0-7.2。

4.如權利要求1所述的一種含中性蛋白酶的飼料復合酶，其特征在于，制備中性蛋白酶的種子罐培養基組成為：麥芽糊精5-15%，酵母粉0.4-0.8%，中草藥粉劑1.5-2%，海藻糖1-3%，蛋白胨0.1-0.5%，玉米漿0.1-0.5%，磷酸氫二鉀0.8-1.5%，硫酸鎂0.05-0.1%，檸檬酸鈉0.1-0.5%，不足部分純凈水補足，pH值7.0-7.2。

5.如權利要求1所述的一種含中性蛋白酶的飼料復合酶，其特征在于，制備中性蛋白酶時種子罐發酵液菌體濃度為7.0x10⁸-8.0x10⁸個/ml。

6.如權利要求1所述的一種含中性蛋白酶的飼料復合酶，其特征在于，制備中性蛋白酶的發酵培養基組成為：麥芽糊精50-150g，玉米粉50-60g，豆餅粉15-25g，中草藥粉劑30-50g，海藻糖30-40g，酵母粉4-8g，玉米漿1-5g，硫酸銨1-3g，磷酸氫二鉀1-2g，磷酸二氫鉀1-2g，檸檬酸鈉1-5g，消泡劑0.1-1g,純凈水l000mL，pH值7.0-7.2。

7.一種含中性蛋白酶的飼料復合酶的制備方法，其特征在于，將所述保護劑、中草藥提取物、濃縮麥芽酶分別超微粉碎，確保粒度小于所述中性蛋白酶及其它酶制劑，然后與中性蛋白酶、酸性蛋白酶、酸性木聚糖酶、纖維素酶、β-葡聚糖酶、果膠酶、淀粉酶、甘露糖酶、植酸酶，均勻混合，最后加入激活劑，混合均勻后密封包裝即得成品含中性蛋白酶的飼料復合酶。