[發明專利]一種快速繁育鐵皮石斛的方法

有效

• 申請號: 201310681992.4
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN103688857A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 嚴成其;俞潔;張玲菊;林明;斯金平;朱玉球;沈嵐;劉健;王芳;朱宏芬;張國芳;龔松年;黃堅
• 申請（專利權）人: 奉化市九味圣草堂鐵皮石斛專業合作社
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京鼎佳達知識產權代理事務所(普通合伙) 11348
• 代理人: 侯蔚寰

1.快速繁育鐵皮石斛的方法，其包括：

1）取鐵皮石斛植株上的葉片，經消毒和水洗后，切成0.01～0.3mm（優選是0.05～0.25mm，更優選是0.1～0.2mm）的葉塊；

2）在誘導胚性愈傷培養基上將葉塊培養成胚性愈傷組織；

3）在原球莖液體懸浮培養基上將胚性愈傷組織培養成原球莖；

4）在繼代生長培養基上將原球莖培養成小苗；和

5）在生根培養基上使得小苗長成試管苗。

2.權利要求1所述的方法，其中

誘導胚性愈傷培養基的配方為：含瓊脂的基本培養基+水解乳蛋白0.8～1.2g/L+ABA0.2～1.2mg/L+BA0.8～1.6mg/L+NAA0.6～1.2mg/L；

原球莖液體懸浮培養基的配方為：1/2不含瓊脂的基本培養基+ABA0.2～0.6mg/L+BA0.2～0.8mg/L+NAA0.1～0.5mg/L；

繼代生長培養基的配方為：含瓊脂的基本培養基+BA0.1～0.3mg/L+NAA0.1～0.3mg/L+馬鈴薯0.25～0.35kg/L；和/或，

生根培養基的配方為：含瓊脂的基本培養基+NAA0.1～0.3mg/L；

而且上述培養基中，含瓊脂的基本培養基的配方為：MS基本培養基+蔗糖22～28g/L+瓊脂6～10g/L，pH5.5～6；和/或，不含瓊脂的基本培養基的配方為：MS基本培養基+蔗糖22～28g/L，pH5.5～6。

3.權利要求1所述的方法，其中

步驟1）中的消毒和水洗是依次用水洗、用酒精消毒、用升汞消毒和用水洗；

步驟2）是將葉塊接種在誘導胚性愈傷培養基上，先在25土3℃、光強1000土100lux、光照16土2小時∕天的條件下培養，至四周后光照增強到2000土200lux，六周后光照增強到4000土400lux，繼續培養至生長出胚性愈傷組織；

步驟3）是將胚性愈傷組織接種在原球莖液體懸浮培養基上，以轉速50土10rpm、25土3℃和黑暗條件下培養,其中每15土5天更換一次新鮮的原球莖液體懸浮培養基，培養至出現原球莖；

步驟4）是將原球莖接種在繼代生長培養基上，在25土3℃、光強2500土300lux、光照16土2小時∕天的條件下培養，直至長成小苗；和/或，

步驟5）是將小苗接種到生根培養基上，在25土3℃，光強2500土300lux、光照16土2小時∕天下培養，直至長成試管苗。

4.權利要求1所述的方法，其中葉片是非芽葉片。

5.權利要求1所述的方法，其中步驟1）中的鐵皮石斛植株是非苗鐵皮石斛植株。

6.鐵皮石斛植株上的葉片或由該葉片切成的葉塊在快速繁育鐵皮石斛中的應用。

7.權利要求6所述的方法，其中葉片是非芽葉片。

8.權利要求6所述的方法，其中葉塊是0.01～0.3mm（優選是0.05～0.25mm，更優選是0.1～0.2mm）的葉塊。

9.權利要求6所述的方法，其中鐵皮石斛植株是非苗鐵皮石斛植株。

10.權利要求6所述的方法，其中快速繁育鐵皮石斛是以權利要求1～5之任一所述的方法快速繁育鐵皮石斛。