[發明專利]一種普利卡那肽的制備方法

有效

• 申請號: 201310680490.X
• 申請日: 2013-12-11
• 公開（公告）號: CN103694320A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 朱日成;宓鵬程;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳翰宇藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K7/64
• 分類號: C07K7/64;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/02
• 代理公司: 深圳市深佳知識產權代理事務所(普通合伙) 44285
• 代理人: 唐華明

技術領域

本發明涉及多肽藥物制備領域，尤其涉及一種普利卡那肽的制備方法。

背景技術

慢性便秘的治療通常使用較多的是輕瀉劑，但是輕瀉劑不能有效改善便秘的癥狀，2008年一項研究顯示，雖然16%～40%的便秘患者使用輕瀉劑，但癥狀依然存在，與未使用輕瀉劑的患者相比沒有顯著差別。2007年一項基于網絡的調查顯示，有47%的患者對輕瀉劑不完全滿意，其中82%由于療效不佳，16%由于安全性。因此，現有的治療還不能滿足慢性便秘者的治療需要。

目前便秘治療的非輕瀉劑包括：阿片類受體拮抗劑（如溴甲納曲酮，僅適用于阿片誘導的便秘）、氯離子通道活化劑（如魯比前列酮）、5-HT4受體激動劑（如普盧卡必利）、鳥苷酸環化酶刺激劑[如linaclotide，正在進行便秘型IBS（IBS-C）的Ⅲ期臨床研究]。但治療慢性便秘的非輕瀉劑仍有待進一步的開發。

美國Synergy制藥公司于2013年1月2日宣布，其在研藥物普利卡那肽用于治療慢性特發性便秘（CIC）具有較好的耐受性，Ⅱb/Ⅲ期臨床試驗取得積極結果。

普利卡那肽，英文名稱為Plecanatide，是一種多肽藥物，其結構如式I所示：

其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，其肽序中N端第4位半胱氨酸（標記為Cys⁴）與第12位半胱氨酸（標記為Cys¹²）成環，第7位半胱氨酸（標記為Cys⁷）與第15位半胱氨酸（標記為Cys¹⁵）成環。

普利卡那肽是一種鳥苷酸環化酶C（GC-C）受體激動劑，其治療機理與利尿鈉肽尿鳥苷素相似，可誘導液體分泌進入胃腸道，從而增加胃腸動力。普利卡那肽為一類新的口服制劑，無需注射就可以直接口服用藥，可為眾多患者接受。這類制劑模仿利鈉肽Uroguanylin的作用，誘導腸液分泌的胃腸道進入管腔。其作為一種可模擬胃腸液體調節肽效應的新藥，對成人慢性特發性便秘的客觀指標和患者自評轉歸有效。

但是，普利卡那肽的制備方法目前在國際上仍屬空白，至今尚無適合大規模生產且收率高、雜質含量低的普利卡那肽的制備方法報道。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種普利卡那肽的制備方法，該方法收率高，且雜質含量低，適合大規模工業化生產。

本發明提供的普利卡那肽的制備方法包括以下步驟：

步驟1：固相合成Fmoc-Leu-樹脂；

步驟2：按照普利卡那肽的肽序，在Fmoc-Leu-樹脂上依次偶聯-Cys¹⁵、-Gly、-Thr、-Cys¹²、-Ala、-Val、-Asn、-Val、-Cys⁷、-Leu、-Glu、-Cys⁴、-Glu、-Asp、-Asn，制得普利卡那肽線性肽樹脂，經裂解制得普利卡那肽線性粗肽；

步驟3：取普利卡那肽線性粗肽，經第一環化、第二環化，即得。

作為優選，Cys⁴和Cys¹²的側鏈保護基為叔丁基，Cys⁷和Cys¹⁵的側鏈保護基為乙酰胺甲基；或Cys⁴和Cys¹²的側鏈保護基為乙酰胺甲基，Cys⁷和Cys¹⁵的側鏈保護基為叔丁基。

優選的，Cys⁴和Cys¹²的側鏈保護基為叔丁基，Cys⁷和Cys¹⁵的側鏈保護基為乙酰胺甲基，第一環化具體為：采用過氧化氫水溶液使普利卡那肽線性粗肽中Cys⁴和Cys¹²間形成二硫鍵，第二環化具體為：采用碘的水溶液或碘的甲醇溶液使普利卡那肽線性粗肽中Cys⁷和Cys¹⁵間形成二硫鍵。