[發(fā)明專利]木瓜飲片的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310680281.5
• 申請日: 2013-12-10
• 公開（公告）號: CN103645257A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李彤;王瓊;薛亮;蔡京
• 申請（專利權(quán)）人: 上海景峰制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海天翔知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31224
• 代理人: 呂伴

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及中藥飲片的檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及木瓜飲片的檢測方法。

背景技術(shù)：

野木瓜[Chaenom?eles?cathayensis(Hemsl.)Schneid]是一種比較珍貴,藥食一體的天然植物,盛產(chǎn)于“中國野木瓜之鄉(xiāng)”———貴州省正安縣。野木瓜中所含齊墩果酸(oleanolic)、熊果酸(ursolic)等五環(huán)三萜皂苷是其主要的生理活性物質(zhì)。

近年來研究表明:齊墩果酸、熊果酸不僅具有消炎抑菌、降低轉(zhuǎn)氨酶、促進肝細胞再生、防止肝硬化等功效,還具有一定的抗癌活性,且以熊果酸尤為突出,故而對野木瓜中齊墩果酸及熊果酸展開研究,具有非常重要的科學(xué)意義。

目前在采用測定三萜皂苷所常用的比色法、分光光度法及薄層掃描法對木瓜飲片中的齊墩果酸與熊果酸進行定量時,由于兩者幾乎是共生共存于天然產(chǎn)物當(dāng)中,并且是一對差向異構(gòu)體,結(jié)構(gòu)相似,極性差別小,因而很容易產(chǎn)生誤差,造成定量困難。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明所解決的技術(shù)問題在于針對現(xiàn)有采用測定三萜皂苷所常用的比色法、分光光度法及薄層掃描法對木瓜飲片中的齊墩果酸與熊果酸進行定量時所存在的不足之處而提供一種木瓜飲片的檢測方法，該檢測方法完善了藥典木瓜飲片含量檢測方法中的條件，保證了含量測定的準(zhǔn)確性，同時，確保了所要求的分離度，以便檢驗工作有效開展。

本發(fā)明擬從它們結(jié)構(gòu)當(dāng)中孤立的雙鍵,會在低波長處產(chǎn)生紫外吸收的特點著手,建立起同時測定木瓜中齊墩果酸、熊果酸的HPLC法，優(yōu)化了藥典中木瓜飲片含量檢測的色譜條件。

本發(fā)明所解決的技術(shù)問題可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

木瓜飲片檢測方法，其測量時的色譜條件為色譜柱：C18柱;流動相為甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液（90：10）；流速1.0mL/min；檢測波長210nm；柱溫；室溫；進樣量20μL。

由于采用了如上的方法，可以保證檢測木瓜飲片的分離度與重復(fù)性，對數(shù)據(jù)分析和產(chǎn)品的研究有很大幫助，減小測量帶來誤差，特別適合實驗室對其進行的檢測工作。

附圖說明

圖1為齊墩果酸與熊果酸的氣相色譜圖。

圖2為齊墩果酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。

圖3為熊果酸的的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。

具體實施方式

本發(fā)明擬從它們結(jié)構(gòu)當(dāng)中孤立的雙鍵,會在低波長處產(chǎn)生紫外吸收的特點著手,建立起同時測定木瓜中齊墩果酸、熊果酸的HPLC法，優(yōu)化了藥典中木瓜飲片含量檢測的色譜條件。

本發(fā)明的木瓜飲片的檢測方法，其測量時色譜條件為色譜柱為：C18柱；流動相為甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液（90∶10）；流速1.0mL/min；檢測波長210nm；柱溫:室溫；進樣量20μL。

以下通過具體實施例來予以驗證：

1.主要儀器

Aileng1100高效液相色譜儀:包括高壓輸液泵,紫外可見光檢測器,柱溫箱；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；梅特勒分析天平；超純水制備儀；超聲波清洗器等。

2.原料與試劑

木瓜飲片,由上海華宇藥業(yè)有限公司提供1010008-13041101;齊墩果酸、熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品(純度大于98%,中國藥品生物制品檢定所提供)；甲醇(色譜純默克提供),其它試劑均為國產(chǎn)分析純。

3.方法

3.1.色譜條件

C18柱；流動相為甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液（90∶10）；流速1.0mL/min；檢測波長210nm；柱溫:室溫；進樣量20μL。

3.2.齊墩果酸與熊果酸特征峰分離度測定在HPLC法中,分離度R大于或等于1.5,是準(zhǔn)確定量的前提。

3.3.齊墩果酸標(biāo)品溶液制備

精密稱取減壓干燥至恒重的齊墩果酸標(biāo)品4.00mg,至10mL容量瓶,加甲醇溶解稀釋至刻度,得濃度為0.40mg/mL的對照品溶液。再分別精密吸取該液0.50、1.00、1.50、2.00、2.50mL,于10mL容量瓶中,加甲醇定容,得濃度梯度為0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/mL的齊墩果酸標(biāo)品溶液。

3.4.熊果酸標(biāo)品溶液制備

精密稱取減壓干燥至恒重的熊果酸標(biāo)品12.00mg,至10mL容量瓶,加甲醇溶解稀釋至刻度,得濃度為1.20mg/mL的對照品溶液。再分別精密吸取該液0.50、1.00、1.50、2.00、2.50mL,于10mL容量瓶中,加甲醇定容,得濃度梯度為0.06、0.12、0.18、0.24、0.30mg/mL的熊果酸標(biāo)品溶液。