[發(fā)明專利]α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三聯(lián)檢測卡及其檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310680080.5
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN103675219A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周堅;王黎麗;唐愛明;丑亞琴;劉增再
• 申請（專利權(quán)）人: 長沙安迪生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/04
• 分類號: G01N33/04;G01N33/68
• 代理公司: 長沙市融智專利事務(wù)所 43114
• 代理人: 潘傳軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種乳制品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白含量的檢測器具和檢測方法，屬于乳制品檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

牛奶是人們?nèi)粘Ｉ钪匾氖称罚瘜W(xué)成分很復(fù)雜，主要由水、脂肪、磷脂、蛋白質(zhì)、乳糖和無機鹽等組成。所以牛奶制品中的蛋白質(zhì)含量是評價牛奶質(zhì)量好壞的一項重要指標(biāo)。根據(jù)我國滅菌乳GB54082-1999對乳及乳制品質(zhì)量控制指標(biāo)，要求100g奶中蛋白質(zhì)的含量大于2.9g。由于目前國標(biāo)GB/T5009.5-1985中規(guī)定蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法為凱氏定氮法，其方法是通過檢測氮的含量推算得到蛋白質(zhì)含量，對于氮源不具備識別能力。面對凱氏定氮法存在的局限性，市場上還有通過測定酪蛋白的含量來判斷牛奶中是否摻假的測定方法，但是由于牛奶中的蛋白主要為酪蛋白、乳清蛋白等，單獨選用酪蛋白作為蛋白質(zhì)的評價指標(biāo)也存在一定的局限性。

牛奶中的蛋白質(zhì)主要為酪蛋白和乳清蛋白。α-乳白蛋白和β-乳球蛋白是乳清蛋白主要成分，其中α-乳白蛋白占總蛋白3.5%，β-乳球蛋白占總蛋白12%左右。酪蛋白不是單一的蛋白質(zhì)，而是由α-、β-、γ-、κ-四種類型構(gòu)成，其中β-酪蛋白約占總蛋白18%。

本發(fā)明的α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三聯(lián)檢測卡涉及牛奶蛋白質(zhì)中三種蛋白指標(biāo)，可快速綜合判斷乳及乳制品中蛋白含量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種操作簡便快捷、成本低、攜帶方便、非專業(yè)人員也能操作及可進行現(xiàn)場檢測的膠體金試紙，且能同時檢測牛奶中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白是否達(dá)標(biāo)，克服現(xiàn)有技術(shù)操作繁瑣、專業(yè)要求高的缺陷。

本發(fā)明的技術(shù)方案：一種α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三聯(lián)檢測卡，在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼1中設(shè)置測試條2，檢測卡外殼1表面有檢測窗孔3和加樣孔4，測試條2是由支承背板5上通過不干膠在其上依次粘貼樣品墊8、膠體金膜7、14、15、硝酸纖維素膜6和吸水膜9所組成；支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板5一端疊置粘貼吸水膜9，另一端疊置粘貼樣品墊8，吸水膜9內(nèi)端與樣品墊8內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜6搭接，在樣品墊8與硝酸纖維素膜6的搭接部，兩者之間夾置粘貼數(shù)段膠體金膜7、14、15；膠體金膜依次為含抗α-乳白蛋白抗體、抗β-乳球蛋白抗體、抗β-酪蛋白抗體的膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜6上有三條檢測帶和一條質(zhì)控帶，依次是：含α-乳白蛋白檢測帶10，含β-乳球蛋白檢測帶11，含β-酪蛋白檢測帶12，含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶13；測試條置入檢測卡外殼1內(nèi)，樣品墊正對加樣孔4，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔3。

所述的α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三聯(lián)檢測卡，其特征是應(yīng)用免疫學(xué)的方法直接檢測樣品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白的含量，檢測樣品為乳制品，處理方法如下：

針對液態(tài)奶樣品的處理方法是：液態(tài)奶用樣品稀釋液進行10倍稀釋后用于檢測；

針對奶粉樣品的處理方法是：稱取1g奶粉樣品，加入9mL樣品稀釋液，在試管中攪拌均勻，再用樣品稀釋液進行10倍稀釋后用于檢測；

針對奶制品樣品的處理方法是，取1g搗碎后的奶制品樣品，加入9mL樣品稀釋液，在試管中攪拌均勻，再用樣品稀釋液進行10倍稀釋后用于檢測；

上述三種不同乳制品所采用的處理方法中所使用的樣品稀釋液為pH7.6、10mmol?PBST溶液。

當(dāng)質(zhì)控帶13和檢測帶10、11、12同時顯現(xiàn)棕紅色印跡帶，檢測結(jié)果為陽性，表示被檢測樣品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白含量低于正常值；

當(dāng)質(zhì)控帶13顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測帶10不出線，表示樣品中α-乳白蛋白含量正常；檢測帶11不出線表示樣品中β-乳球蛋白含量正常；檢測帶12不出線表示樣品中β-酪蛋白含量正常；當(dāng)質(zhì)控帶13和檢測帶10、11、12均不顯色，則表示檢測卡已失效。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明三聯(lián)檢測卡能同時檢測出乳及乳制品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白的含量，本三聯(lián)檢測卡易于制備且節(jié)省檢測費用，使用方便快速，結(jié)果準(zhǔn)確。

附圖說明

圖1為α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三聯(lián)檢測卡的外殼及測試條在外殼內(nèi)的安置圖。1、外殼，2、測試條，3、檢測窗孔，4、加樣孔。

圖2為α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三聯(lián)檢測卡的測試條結(jié)構(gòu)示意圖。5、支承背板，6、硝酸纖維素膜，7、膠體金膜，14、膠體金膜，15、膠體金膜，8、樣品墊，9、吸水膜。