[發明專利]一種林可霉素化學發光酶聯免疫快速檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201310673629.8
• 申請日: 2013-12-12
• 公開（公告）號: CN103675286A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 王善普;李秀梅;王興兵;靳婉霞;王宇東
• 申請（專利權）人: 洛陽萊普生信息科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N21/76
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 時國珍

1.一種林可霉素化學發光酶聯免疫快速檢測試劑盒，包括盒體、設在盒體內的酶標板和設在盒體內試劑，其特征在于：所述酶標板的各孔包被有包被抗原，其中包被抗原由林可霉素的代謝物與卵清蛋白偶聯制成；所述試劑包括：林可霉素的單克隆抗體、酶標二抗、林可霉素系列標準溶液、濃縮磷酸鹽緩沖液、濃縮洗滌液和發光液，所述的酶標二抗為辣根過氧化酶標記的羊抗鼠的抗體。

2.如權利要求1所述的林可霉素化學發光酶聯免疫快速檢測試劑盒，其特征在于：所述酶標板為不透明的聚苯乙烯8孔×12條的96孔化學發光酶標板。

3.如權利要求1所述的林可霉素化學發光酶聯免疫快速檢測試劑盒，其特征在于：所述包被抗原濃度為5μg/ml。

4.如權利要求1所述的林可霉素化學發光酶聯免疫快速檢測試劑盒，其特征在于：所述林可霉素的單克隆抗體是由林可霉素的代謝物與分子量范圍是6.7KDa~6.8?KDa的牛血清蛋白偶合制成的偶聯物作為免疫原免疫小鼠制備得到的單克隆抗體，其工作濃度為1:15000。

5.一種利用權利要求1所述的林可霉素化學發光酶聯免疫快速檢測試劑盒檢測殘留林可霉素抗生素的方法，使用林可霉素系列標準溶液濃度分別為：0.1ng/mL（0標準）、0.5ng/mL、0.8ng/mL?、lng/mL、5ng/mL、10ng/mL，其特征在于：包括以下步驟：

1）加樣：按照50μL/孔的加入量，向酶標板的孔中分別加入林可霉素系列標準濃度溶液和樣品溶液，然后按照50μL/孔的加入量，向各孔中加入林可霉素抗體工作液，之后室溫恒溫孵育2.5h；

2）洗滌：傾出孔中液體，向酶標板中加入280μL/孔的洗滌液，靜置5min后拍干，重復三次；

3）加酶標二抗：每孔加入酶標二抗工作液100μL，室溫恒溫孵育1.5h；

4）洗滌：傾出孔中液體，向酶標板中加入280μL/孔的洗滌液，靜置5min后拍干，重復三次；

5）加發光液：每孔加入發光液100μL；

6）檢測：用化學發光免疫分析儀測定每孔的發光強度；

7）結果判定：以所測得的林可霉素系列標準濃度溶液對應的孔的發光值，除以第一個標準（0標準）的發光值再乘以100，得到抑制率B/B0%，以抑制率為縱坐標，各林可霉素系列標準濃度溶液濃度的對數為橫坐標作標準曲線，根據樣品溶液所對應的孔的發光值和所得標準曲線，計算得到樣品溶液的濃度。