[發明專利]一種團頭魴肌間骨總RNA提取方法有效
| 申請號： | 201310673534.6 | 申請日： | 2013-12-11 |
| 公開（公告）號： | CN103642797A | 公開（公告）日： | 2014-03-19 |
| 發明（設計）人： | 高澤霞;萬世明;易少奎;鐘嘉;王衛民 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 武漢宇晨專利事務所 42001 | 代理人： | 王敏鋒 |
| 地址： | 430000 *** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 團頭魴肌間骨總 rna 提取 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種團頭魴肌間骨總RNA提取方法，其步驟是：
1）以團頭魴為材料：取其肌間骨置于滅菌預冷的研缽中，后邊加液氮邊研磨，至肌間骨研磨至粉末狀后轉入2ml離心管中，每50mg肌間骨粉末加1mlTrizol，搖勻，室溫放置4－6min；
2）4℃，12000rpm離心4－6min，取上清液，加入1/5體積的氯仿，搖晃15sec，充分乳化為無分層的均勻白色乳液，室溫放置4－6min；
3）4℃，12000rpm離心15min，取上清液用氯仿重復抽提1－2次；
4）取上清液，加入等體積的異丙醇、200μl0.?8mol/L檸檬酸鈉、200μl1.?2mol/L氯化鈉，充分混勻，-20℃靜置3－5小時；
5）靜置過后，4℃，12000rpm離心10min，棄上清液留沉淀，加DEPC水配置的75%體積比乙醇，溫和震蕩，重復洗滌沉淀1－3次；
6）4℃，7500rpm離心4－6min，棄上清液留沉淀，自然晾干，加30μlDEPC水溶解RNA，得總RNA溶液。
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