[發明專利]一種抗間皮素納米抗體及其編碼基因和該納米抗體的用途

有效

• 申請號: 201310667427.2
• 申請日: 2013-12-10
• 公開（公告）號: CN103819559B
• 公開（公告）日: 2016-02-24
• 發明（設計）人: 龔睿;肖庚富;徐婷;張哲;陳小波
• 申請（專利權）人: 中國科學院武漢病毒研究所
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;G01N33/574;G01N33/569;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 北京捷誠信通專利事務所(普通合伙) 11221
• 代理人: 魏殿紳;龐炳良

技術領域

本發明涉及一種抗腫瘤分化抗原的納米抗體及其編碼基因和該納米抗體的用途。

背景技術

間皮素(mesothelin，MSLN)是近年來新發現的一種腫瘤分化抗原。其前體是糖磷脂酰基醇(GPI)錨定的、糖基化的細胞表面蛋白，可被furin蛋白酶水解為31kD的N-末端分泌型蛋白和40kD的C-末端蛋白，后者主要以膜結合的GPI錨定的形式存在，有限分布于正常間皮細胞及表面上皮細胞，故命名為間皮素。

間皮素在正常組織中有限表達，而在某些腫瘤中高表達，如胰腺癌(100％病例)、卵巢腺癌(70％的病例)、肺腺癌(50％的病例)和惡性間皮瘤(100％的病例)等。間皮素誘導腫瘤發生的機制可能包括以下三個方面：

第一，間皮素可以通過與粘蛋白MUC16(即CA125)相互作用而促進腫瘤細胞的腹膜種植和轉移；

第二，間皮素能通過NF-κB信號通路促進腫瘤細胞的存活和增殖；

第三，間皮素的表達會增強腫瘤細胞對某些特定的藥物(如：TNF-α、紫杉醇、鉑-環磷酰胺復合物)的耐受能力。

由此可見，間皮素是一個用于腫瘤治療的理想靶標。

發明內容

間皮素作為一種用于腫瘤治療的理想靶標，本發明提供一種抗腫瘤分化抗原的納米抗體及其編碼基因和該納米抗體的用途。

本發明抗間皮素的納米抗體的氨基酸如SEQIDNO：2所示。

上述抗間皮素的納米抗體編碼基因的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。

用上述抗間皮素的納米抗體制備高表達間皮素癌細胞的探針。

用上述抗間皮素的納米抗體制備抑制高表達間皮素癌細胞的藥物。

本發明抗間皮素的納米抗體被命名為納米抗體mesnab1。納米抗體mesnab1能夠特異性結合腫瘤細胞表面表達的間皮素，通過對腫瘤細胞的遷移等抑制作用而用于高表達間皮素癌癥的治療。

本發明納米抗體mesnab1可用于治療和診斷間皮素高表達的腫瘤(如胰腺癌、卵巢腺癌、肺腺癌和惡性間皮瘤)，以及研究間皮素在腫瘤發生中的作用。

本發明納米抗體mesnab1分子量較小，約15kD，因此具有更好的組織滲透性，結合空間上存在位阻效應的抗原表位的能力也更強。所以，可以將本發明納米抗體mesnab1作為口服藥用于治療間皮素高表達的腫瘤。

本發明納米抗體mesnab1具有與FcRn的結合能力，血漿半衰期長達10h。

本發明納米抗體mesnab1可在原核表達系統進行表達，具有生產成本低、周期短的優點。

附圖說明

圖1是實施例3中納米抗體mesnab1和間皮素結合ELISA測定結果圖，圖1中“■”曲線為納米抗體mesnab1，圖1中“●”曲線為陰性對照抗體m01s；

圖2是實施例4中與納米抗體mesnab1共孵育的人卵巢癌細胞SK-OV-3細胞明場觀察圖；

圖3是實施例4中與納米抗體mesnab1共孵育的人卵巢癌細胞SK-OV-3細胞TexasRed熒光檢測圖；

圖4是實施例4中與納米抗體mesnab1共孵育的人卵巢癌細胞SK-OV-3細胞DAPI染色檢測圖；

圖5是實施例4中與抗體m01s共孵育的人卵巢癌細胞SK-OV-3細胞明場觀察圖；

圖6是實施例4中與抗體m01s共孵育的人卵巢癌細胞SK-OV-3細胞TexasRed熒光檢測圖；

圖7是實施例4中與抗體m01s共孵育的人卵巢癌細胞SK-OV-3細胞DAPI染色檢測圖；

圖8是實施例5流式細胞分析檢測圖。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明說明，本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意組合。

具體實施方式一：

本實施方式抗間皮素的納米抗體的氨基酸如SEQIDNO：2所示。

本實施方式抗間皮素的納米抗體可用于高表達間皮素癌癥的治療，包括胰腺癌、卵巢腺癌、肺腺癌和惡性間皮瘤等。

本實施方式抗間皮素的納米抗體可用作探針，用于檢測高表達間皮素的腫瘤，如胰腺癌、卵巢腺癌、肺腺癌和惡性間皮瘤等。

本實施方式抗間皮素的納米抗體還可以與自身或其它多肽融合，用于高表達間皮素癌癥的治療和檢測。