[發明專利]一株耐受低鹽的裂殖壺菌及其應用

有效

• 申請號: 201310660051.2
• 申請日: 2013-12-05
• 公開（公告）號: CN103911292A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 李德茂;張可;陳樹林;王海軍;王迪;高峰
• 申請（專利權）人: 中國科學院天津工業生物技術研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N13/00;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

技術領域

本發明涉及微生物應用領域，特別涉及一株耐受低鹽的裂殖壺菌及其應用。?

背景技術

二十二碳六烯酸(cis-4,7,10，13，16，19-docosahexaenoic?acid，簡稱DHA)因其在人體體內的重要生理作用越來越受到人們的重視。研究表明，DHA是人體某些組織中細胞膜的基本組分，對嬰兒視覺系統和神經系統的發育起著重要作用，此外，它還具有降低膽固醇，抗凝血、預防癌癥等生理作用。傳統的DHA從深海魚油中獲得，但從魚油中提取的PUFAs存在著產量不穩、得率低、及含農藥殘留等問題，并且隨著漁業資源的日益緊張，傳統的DHA資源已無法滿足日益增長的市場需求。因此，開發DHA的新生資源已成為新的研究熱點。?

裂殖壺菌(Schizochytrium)是隸屬于破囊壺科的一種海洋真菌，該菌中DHA含量豐富，還含有少量的DPA，而其他不飽和脂肪酸的含量很低。破囊壺科真菌不致病、不產毒，美國FDA將其列為公認安全級(Generally?Recognized?as?Safe，GRAS)。此外，裂殖壺菌具有生產周期短、培養簡單等優勢，被認為是一種具有潛力的DHA的新生資源，是目前進行工業化培養、作為DHA來源最理想的物種之一。?

由于裂殖有壺菌的海生屬性，其生長過程要求有適宜的鹽度，Zhu等人發現在培養基鹽度在1.8-3.6％范圍內變化時，裂殖壺菌的干重變化不大，干重平均值為24.51g/L，但是當鹽度將至0.9％和0％時，裂殖壺菌的干重明顯?降低，分別為18.75g/L和7.86g/L；就油脂含量而言，當鹽度從3.6％降至0.9％時，油脂含量從41.34％上升至48.97％，但鹽度繼續降至0％時，油脂含量則驟降至30.55％(Zhu?L，Zhang?X，Ji?L，et?al.Changes?of?lipid?content?and?fatty?acid?composition?of?Schizochytrium?limacinum?in?response?to?different?temperatures?and?salinities[J].Process?Biochemistry,2007，42(2)：210-214.)。陳誠對Schizochytrium?limacinum?SR21的培養條件進行優化后，認為培養基中海水晶濃度為20g/L時能能夠得到較高的DHA產量(陳誠.裂殖壺菌Schizochytrium?limacinum?SR21發酵制備二十二碳六烯酸(DHA)過程的初步研究[D].浙江大學，2007.)；T.Yaguchi等在對Schizochytrium?limacinum?SR21進行發酵生產DHA時，在培養基中加入了50％的人工海水(YaguchiT，Tanaka?S，Yokochi?T，et?al.Production?of?high?yields?of?docosahexaenoic?acid?by?Schizochytriumsp.strain?SR21[J].Journal?of?the?American?Oil?Chemists′Society,1997，74(11)：1431-1434.)。由于在生產過程中一般會采用鹽度大于或等于15％的培養基來培養裂殖壺菌，這樣高鹽度的培養基一方面會加速設備的腐蝕，增加生產成本；另一方面高鹽度也會影響廢水中有機物的生物處理效果，容易造成生產廢水COD超標。因此選育一種能夠在低鹽濃度下高效表達DHA的微生物對工業生產的改良具有重要的作用。?

發明內容

本發明目的在于提供一株耐受低鹽的裂殖壺菌。本發明是利用誘變方法對出發菌株進行誘變篩選出可以在低鹽濃度下高效表達DHA的耐受低鹽的裂殖壺菌B4D1。?

為實現上述目的，本發明所采取的技術方案為：?

一株耐受低鹽的裂殖壺菌，其特征在于，所述菌株在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為：CGMCC?No.8313，保藏單位地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏日?期為：2013年10月9日，分類命名為：蛞蝓形裂殖壺菌（Schizochytrium?limacinum）。?

優選的是，所述裂殖壺菌B4D1是將裂殖壺菌SR21經誘變方法處理后篩選得到的。?

優選的是，將所述裂殖壺菌SR21在無菌條件下用5-20w紫外燈在距離20-60cm處照射10-60s進行誘變處理。?

優選的是，將所述無菌條件下用8w紫外燈在距離25cm處照射10s進行誘變處理。?