[發明專利]一種硒的檢測方法

有效

• 申請號: 201310658482.5
• 申請日: 2013-12-09
• 公開（公告）號: CN103884785A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 陳永波;李紅英;胡百順;孫楊柳;朱云芬;郭光耀
• 申請（專利權）人: 恩施土家族苗族自治州農業科學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種硒的檢測方法。?

背景技術

目前，硒的形態分析方法是硒檢測技術發展的必然趨勢，國內外研究者以HPLC-ICP-MS、HPLC-MS-MS、GC-MS等聯用技術為基礎，對硒代氨基酸和無機硒的形態分析方法做了大量的研究工作，但沒有形成標準。近些年來，在我國發展起來的HPLC-HG-AFS聯用技術，采用高效液相色譜分離-在線氫化物發生-原子熒光檢測法進行形態分析，結合了HPLC高效分離和AFS高靈敏度的優勢，對能夠形成氫化物的元素形態進行分析，是現階段元素形態發展的主要方向。?

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種使用方便的硒的檢測方法。?

本發明的技術方案是：一種硒的檢測方法，其特征在于包含以下步驟：a.分析儀器系統配置：將色譜分離系統、原子熒光分光光度計及硒形態預處理裝置組合成HPLC-HG-AFS聯用系統；色譜柱要能夠對SeO₃⁴⁺、SeO₄⁶⁺、硒代氨基酸及衍生物、二甲基硒、硒脲小分子物質有保留的C₁₈柱或陰離子交換柱；所述的硒形態預處理裝置為能夠與色譜分離系統連接，將色譜系統分離的待測樣品中含硒成分轉化為氫化物的硒形態預處理裝置；?

b.儀器分析方法：流動相為不同濃度的（NH₄）₂HPO₄緩沖液或添加有機試劑的溶液；洗脫方式采用30mM-150mM的pH3-9磷酸氫二銨緩沖液配制成一種流動相等度洗脫或改變流速進行梯度洗脫，也可配制成2種以上不同濃度的流動相，通過改變流動相的比例進行梯度洗脫；進樣可采用手動或自動2種方式，進樣體積在0.1μL-100μL之間；其它參數按照儀器設備使用說明書推薦設定；所述的添加有機試劑的溶液為添加甲醇或其它有機試劑的溶液；?

c.硒形態的檢測方法：提取溶劑為0.1-1N的HCl、HClO₄、NaOH、胃蛋白酶K水溶液和50%-100%的CH₃OH溶液，用HCl和HClO₄提取的溶液，用NaOH溶液調節pH?值到5-6；用NaOH提取的溶液用鹽酸調節pH值到8-9；胃蛋白酶K水提取液和50%-100%的CH₃OH提取液不調節pH值；提取液均經0.45μm濾膜過濾后上機硒的形態，對有標準物質的成分可以定性定量測定，沒有標準物質的成分可為進一步研究提供依據；根據色譜圖中峰的分離狀況和峰高可確定最佳的提取方法；?

d.單質硒的測定：采用少量HNO₃、王水或HNO₃+HClO₄溶解后，用NaOH溶液調節pH值到5-6，經0.45μm濾膜過濾后上機測定，用外標法計算SeO₃⁴⁺的含量，計算硒的回收率，以確定方法的可行性；?

e.無機硒的測定：定性定量測定樣品浸提液中的SeO₃⁴⁺和SeO₄⁶⁺的含量，和為無機硒總量，采用總硒減無機硒的方法可得有機硒含量；?

f.總硒含量的測定：按照GB方法進行樣品消化，消化時可不加鹽酸還原，再用NaOH溶液調節pH值至5-6，定容后上機測定，用外標法計算SeO₃⁴⁺和SeO₄⁶⁺的含量，和為總硒含量。?

本發明采用不同廠家的高效液相色譜和原子熒光形態分析儀組成HPLC-HG-AFS聯用儀，系統地進行了SeCys₂、SeMet、Se(IV)、MeSeCys和Se(VI)等5種硒形態的儀器分析條件、檢測限、線性范圍及樣品中硒形態的提取方法等方面的研究，建立了富硒產品中硒的形態分析方法。?