[發(fā)明專利]基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310656834.3
• 申請日: 2013-12-06
• 公開（公告）號: CN104697968B
• 公開（公告）日: 2018-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡林濤;王宇輝;高篤陽;張鵬飛
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 深圳市科進(jìn)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44316
• 代理人: 沈祖鋒;郝明琴

1.一種基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法，包括下述步驟：

步驟S10：將核酸適配體共價偶聯(lián)至熒光供體表面；

步驟S20：提供一免標(biāo)記熒光受體；

步驟S30：將偶聯(lián)有核酸適配體的熒光供體與所述免標(biāo)記熒光受體混合，直至所述熒光供體的熒光猝滅，得到所述基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器；

步驟S10，將核酸適配體共價偶聯(lián)至熒光供體表面，包括下述步驟：

步驟S11：提供第一緩沖溶液；

步驟S12：在所述第一緩沖溶液中加入質(zhì)量份數(shù)為(5-20)：(5-20)的熒光供體和偶聯(lián)劑，得到第一反應(yīng)液；

步驟S13：離心分離所述第一反應(yīng)液，收集第一上層液體；

步驟S14：將所述第一上層液體添加到第二緩沖溶液中，并加入質(zhì)量份數(shù)為(20-100)的氨基修飾的核酸適配體，得到第二反應(yīng)液；

步驟S15：離心分離所述第二反應(yīng)液，獲取第二上層液體，并置于低溫環(huán)境中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S10中，所述熒光供體為近紅外量子點(diǎn)或納米金或有機(jī)熒光染料。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S20中，所述免標(biāo)記熒光受體為氧化性碳納米顆粒或芳香聚合物。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S11中，所述第一緩沖溶液為MES溶液，所述MES溶液的pH＝6.1，濃度為0.1mol/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S12中，所述偶聯(lián)劑為1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽，N-羥基硫代琥珀酰亞胺。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S14中，所述第二緩沖溶液為HEPES溶液，所述HEPES溶液的pH＝7.2，濃度為0.02mol/L。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于近紅外熒光能量轉(zhuǎn)移生物傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，所述氧化性碳納米顆粒的制備方法，包括下述步驟：

將質(zhì)量份數(shù)為(5-20)的蠟燭灰加入到由硝酸和二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中，得到第三反應(yīng)液；

對所述第三反應(yīng)液進(jìn)行離心分離，收集底部沉淀物；

將所述沉淀物用純水洗滌后，再超聲分散至水溶液中得到所述氧化性碳納米顆粒。