[發明專利]一種治療庫欣病的多肽藥物的制備方法

有效

• 申請號: 201310656466.2
• 申請日: 2013-12-06
• 公開（公告）號: CN103641894A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 宓鵬程;潘俊鋒;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳翰宇藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K7/64
• 分類號: C07K7/64;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 深圳市深佳知識產權代理事務所(普通合伙) 44285
• 代理人: 唐華明

技術領域

本發明屬于藥物化學技術領域，具體涉及一種治療庫欣病的多肽藥物的制備方法，尤其涉及一種帕瑞肽的制備方法。

背景技術

庫欣病是一種危及病人生命的罕見病，由于垂體腫瘤刺激導致促腎上腺皮質激素（ACTH）大量分泌，從而刺激腎上腺生長和分泌大量皮質醇，導致病人出現體重增加（特別在面部和頸部）、皮膚易擦傷、面部汗毛重、肌肉和骨骼變弱、血壓升高等癥狀。手術切除腫瘤是治療庫欣病的有效方法，但手術不能治愈的病人，此前沒有獲得批準的專治藥物。目前許多治療庫欣病的藥均屬于超適應證使用。

帕瑞肽，英文名為pasireotide?diaspartate，其結構為：

帕瑞肽由瑞士諾華制藥有限公司制造，是一種能與多受體結合的生長抑素類似物，與生長抑素受體sst1～3和sst5有高結合力。帕瑞肽能抑制GHI，GF-I和ACTH的分泌，提示其可能用于肢端肥大癥與庫欣病的治療。其中帕瑞肽與生長抑素受體給合后，可阻止ACTH的釋放，從而降低血液中的皮質醇水平，減輕庫欣病的癥狀。臨床研究證明，用900μg帕瑞肽，有41%的病人尿液中的皮質醇水平至少降低50%；用600μg帕瑞肽，有34%的病人尿液中的皮質醇水平至少降低50%。美國食品藥品監督管理局（FDA）已于2012年11月14日批準了了新“孤兒藥”Signifor(帕瑞肽,pasireotide?diaspartate)注射液用于治療不能通過手術治療的庫欣病(Cushing’s?disease)患者。因此帕瑞肽具有很高的藥用價值和廣闊的市場前景。

公開號為CN1446229A的專利中公開了帕瑞肽的合成工藝，通過先制備特殊原料Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-BOC)-OH，然后采用固相方法進行鏈的合成，最后裂解，在液相中進行環化，最終得到帕瑞肽。然而上述方法需要預先合成特殊原料Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-BOC)-OH，然后通過固液相結合方法進行合成，存在反應步驟多，工藝繁瑣，特殊原料不易得，不利于大規模生產等缺點。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的是針對現有技術的缺陷，提供一種帕瑞肽的制備方法，所述制備方法步驟少、帕瑞肽的收率高、適合于帕瑞肽的大規模生產，同時制得的帕瑞肽純度高。

為實現本發明的目的，本發明采用如下技術方案：

一種帕瑞肽的制備方法，包括：

步驟1：將Fmoc-Lys-OAll與固相載體偶聯，得到Fmoc-Lys(Resin)-OAll；

步驟2：Fmoc-Lys(Resin)-OAll逐一偶聯Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Ph?g-OH和Fmoc-Pro(4-OH)-OH，得到Fmoc-Pro(4-OH)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(CTC)-OAll；

步驟3：Fmoc-Pro(4-OH)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(Resin)-OAll與Boc-NH-C₂H₄-NH-COOH偶聯得到Fmoc-Pro(4-OCO-NH-C₂H₄-NH-Boc)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(CTC)-OAll；

步驟4：Fmoc-Pro(4-OCO-NH-C₂H₄-NH-Boc)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(CTC)-OAll依次偶聯Fmoc-Phe-OH和Fmoc-Tyr(Bzl)-OH得到NH₂-Tyr(Bzl)-Phe-Pro(4-OCO-NH-C₂H₄-NH-Boc)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(Resin)-OAll，脫除C端的保護基團-All后環化得到帕瑞肽樹脂；

步驟5：帕瑞肽樹脂裂解得到帕瑞肽粗肽；

步驟6：帕瑞肽粗肽純化得到帕瑞肽。

優選的，步驟1所述固相載體為Trt?Resin或2-CTC?Resin。

優選的，步驟1所述Fmoc-Lys(Resin)-OAll的替代度為0.4～0.6mmol/g。

優選的，步驟1所述偶聯的偶聯劑為二異丙基乙胺。

優選的，步驟2所述偶聯的偶聯劑為DIC/HOBt。

優選的，步驟3所述與Boc-NH-C2H4-NH-COOH偶聯的偶聯劑為DIC/HOBt/DMAP。