[發明專利]一種丹參人工栽培方法

有效

• 申請號: 201310655949.0
• 申請日: 2013-12-05
• 公開（公告）號: CN103733829A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 魏希穎;王鳳霞;馬彩霞;萬陜寧;井明博;劉穎;王喆之
• 申請（專利權）人: 陜西師范大學
• 主分類號: A01G1/00
• 分類號: A01G1/00;A01C1/00;A01G9/10
• 代理公司: 西安西交通盛知識產權代理有限責任公司 61217
• 代理人: 王艾華

技術領域

本發明屬于丹參栽培領域，具體涉及一種丹參人工栽培方法。

背景技術

內生真菌(endophytic?fungi)是指在生活史中的某一個階段存在于健康植物組織內部，不會引起宿主明顯病癥或者對宿主造成明顯傷害的真菌。研究發現植物內生真菌可以通過改善植物的營養條件，促進植物生長，表現在增加植物的總生物量、提高種子發芽率、幼苗存活率以及抑制病原菌等多個方面；還可以通過產生次生代謝物及快速激活宿主的逆境反應系統，增強宿主對環境的生態適應能力。內生真菌在生物制藥、農業生產、工業發酵等方面上表現出美好的應用前景，已受到世界各國專家的廣泛關注。

原料藥丹參為唇形科植物丹參Salvia?mihiorrhiza?Bunge的干燥根及根莖，用于治療冠心病、腦血管疾病和誘導各種癌細胞凋亡等，隨著丹參新藥的不斷研制開發及市場需求量的增加，對丹參需求量亦明顯攀升。丹參的需求量逐漸增加，野生資源不能滿足需要，人工栽培成為解決藥源的根本途徑。丹參繁殖方法有種子繁殖、分根繁殖、扦插繁殖和蘆頭繁殖等，由于分根繁殖、扦插繁殖和蘆頭繁殖能夠縮短丹參生長周期而為人們所常用，但種植的丹參由于長期的無性繁殖，有效成分含量極不穩定、感染病毒病等現象導致品質和產量的下降，嚴重影響了臨床應用和制藥工業的發展。丹參以種子繁殖能很好的解決由于長期的無性繁殖導致品質和產量下降等問題。然而在自然條件下丹參種子萌發率低，不耐貯藏，常溫干燥貯藏丹參種子，每放置30天種子發芽率就下降10％，貯藏時間超過半年，其發芽率低于40%，從而嚴重影響了丹參的人工栽培。

發明內容

本發明的目的在于提供一種丹參人工栽培方法。

為達到上述目的，本發明采用了以下技術方案。

一種丹參人工栽培方法，該丹參人工栽培方法包括以下步驟：

1）浸種：將丹參種子消毒后置于經過滅菌的丹參內生真菌發酵液中浸泡10-12h；

2）萌發：浸種后用無菌水沖洗丹參種子，然后用無菌濾紙吸干丹參種子表面水分，然后放在超凈工作臺內晾干，將晾干后的丹參種子靜置于平皿中的襯墊物上，襯墊物包括鋪于平皿底部的經無菌水浸潤的若干層濾紙以及鋪于所述若干層濾紙上的若干層紗布，靜置過程中定時向平皿中噴無菌水以保持襯墊物濕潤；

3）萌發后的丹參種子經過育苗后移栽。

所述丹參種子為當年的新種子或者貯藏一年至兩年的種子。

所述靜置過程中采用全天光照，溫度控制在25-27℃。

所述育苗包括以下步驟：

將萌發后的丹參種子轉接到MS培養基中進行培養得丹參苗，培養條件為：溫度為晝/夜=23-25℃/16-18℃，光照周期為12/12h，照度為1800-2000Lx。

所述丹參人工栽培方法還包括以下步驟：

在育苗階段，待丹參苗生長至株高2～3cm后，將丹參內生真菌打成菌餅，將菌餅接種于與丹參苗相距1-2cm處的培養基上進行共培養，共培養條件為：溫度為晝/夜=23-25℃/16-18℃，光照周期為12/12h，照度為1800-2000Lx。

所述丹參內生真菌為茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）。

所述丹參內生真菌為茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）TR21菌株、茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）N157菌株、茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）NU152菌株或茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）U104菌株。

移栽15-20天后用丹參內生真菌發酵液進行噴灑處理，每4-5株苗一次噴灑10-15mL丹參內生真菌發酵液，每周噴灑一次。

用于噴灑處理的丹參內生真菌發酵液為茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）TR21菌株、茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）N157菌株或茴香裸胞殼（Emericella?foeniculicola）U104菌株的發酵液。

所述丹參內生真菌發酵液的制備方法包括以下步驟：將丹參內生真菌接種于馬鈴薯葡萄糖液體培養基中，然后置于恒溫搖床中于25-28℃、130-160r/min條件下振蕩培養三到四周得菌培養液，將菌培養液中的菌絲體經真空抽濾除去，然后以4000-5000r/min離心20-30min，得丹參內生真菌發酵液。