[發(fā)明專利]乙型肝炎e抗體測定試劑盒以及檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310654654.1
• 申請日: 2013-12-06
• 公開（公告）號: CN103616372A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳秀發(fā);胡慶鋒;常立峻;徐海偉;李勇
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州長光華醫(yī)生物醫(yī)學工程有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/576
• 代理公司: 南京縱橫知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32224
• 代理人: 董建林

1.一種乙型肝炎e抗體測定試劑盒，其特征在于，包括試劑R、試劑N、試劑M以及對照品，所述試劑R中的組分包括生物素化抗-HBe抗體、吖啶酯標記的抗-HBe抗體、MES緩沖液以及診斷試劑防腐劑；所述試劑N中的組分包括基因重組HBeAg、MES緩沖液以及診斷試劑防腐劑；所述試劑M中組分包括親和素包被磁微粒，所述磁微粒經(jīng)診斷試劑防腐劑處理；所述對照組包括人源性乙肝e抗體、新生牛血清以及診斷試劑防腐劑；所述吖啶酯標記的抗-HBe抗體是以吖啶酯通過偶聯(lián)劑偶聯(lián)抗-HBe抗體，所述偶聯(lián)劑為二甲基亞胺或戊二醛；所述試劑盒還包括以H₂O₂-NaHO₃為基礎(chǔ)的底物液系統(tǒng)，所述底物液系統(tǒng)中含有作為為發(fā)光增強劑的曲通100。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒，其特征在于，所述親和素包被磁微粒中的親和素為鏈霉親和素、中性親和素或類親和素，所述親和素包被磁微粒中的磁微粒是以四氧化三鐵為內(nèi)核表面包裹活性基團的聚合物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒，其特征在于，所述抗-HBe抗體為鼠源單克隆抗-HBe抗體。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒，其特征在于，試劑R和試劑N中所述MES緩沖液的濃度均為0.05M，pH值為6.0。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒，其特征在于，所述診斷試劑防腐劑為0.1%的Proclin300防腐劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R和試劑N的量為12ml，所述試劑M的量為3?ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒，其特征在于，所述對照品包括對照品1和對照品2兩組，所述對照品1的量為0.5ml，濃度為0.0?PEI?U/ml，所述對照品2的量為0.5ml，濃度為2.0?PEI?U/ml。

8.一種使用權(quán)利要求1-7所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒的檢測方法，其特征在于，包括以下幾步：

（1）在將待測樣品和含有基因重組的HBeAg的試劑N混合進行反應，將形成抗體-抗原復合體的反應液1；

（2）在反應液1中加入含有生物素化的e抗體（Anti-HBe）及吖啶酯標記的Anti-HBe的試劑R進行反應，形成生物素化抗體-HBeAg-吖啶酯標記抗體復合體的數(shù)量減少的反應液2；

（3）在反應液2中加入含有親和素包被磁微粒的試劑M，反應液2中的復合體在生物素和親和素的相互作用下形成固相；

（4）將反應液置于化學發(fā)光測定儀上進行檢測，在磁場的檢測中的磁微粒將被吸附，通過洗滌液洗滌，將未結(jié)合物沖洗除去；然后，注入化學發(fā)光激發(fā)液1及化學發(fā)光激發(fā)液2，檢測其化學發(fā)光光子強度；產(chǎn)生的光強度與樣本內(nèi)Anti-HBe濃度成反比。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的乙型肝炎e抗體測定試劑盒的檢測方法，其特征在于，所述化學發(fā)光激發(fā)液1中含有過氧化氫，所述化學發(fā)光激發(fā)液2中含有氫氧化鈉，所述洗滌液含有磷酸鹽緩沖液。