[發明專利]一種microRNA let-7e在制備抗缺血性心律失常藥物中的應用

有效

• 申請號: 201310652769.7
• 申請日: 2013-12-06
• 公開（公告）號: CN103656680A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 呂延杰;楊寶峰;蔡本志
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫科大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61P9/06;A61P9/10
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;韓小雷

技術領域

本發明涉及一種microRNA?let-7e在制備抗缺血性心律失常藥物中的應用，屬于生物醫藥領域。?

背景技術

在我國急性心肌梗死的發病率不斷增加，且日趨年輕化。心律失常是其重要的并發癥之一，并可引發猝死。發現新的有效的抗心律失常和心肌缺血的藥物是保護梗死后的心肌功能，預防惡性心律失常，降低死亡率的重要手段和措施。?

急性心肌梗死后心臟泵血功能下降、血液供應不足。此時，交感神經興奮，突觸前膜釋放大量內源性兒茶酚胺類物質，與心肌細胞膜上的β腎上腺素受體(β-AR)結合，一方面可以激活β腎上腺素受體（β-AR），另一方面可以增加心肌細胞β腎上腺素受體數目的表達。繼而增強心肌收縮力，提高心率，增加心排血量。以增加心臟功能性代償，但同時也增加了心肌耗氧量，使心肌細胞進一步缺血缺氧加重心肌缺血損傷，并誘發心律失常、休克或心力衰竭危及生命。?

β受體阻斷劑能夠競爭性與β受體結合，拮抗β受體作用，降低心肌耗氧量，保護受損的心肌。臨床上主要用于治療高血壓、冠心病、心力衰竭、心律失常、主動脈夾層、心肌病、遺傳性QT延長綜合征和左房室瓣脫垂。?

microRNA(miRNA)是由21-25個核苷酸構成的分子，microRNA通過抑制其靶分子mRNA的翻譯或者促進其降解而起到負性基因表達調控作用，隨著近年研究的不斷深入，人們發現微小RNA分子在細胞功能調控中有著廣泛的作用。如microRNA參與了多種心臟疾病的發生和發展過程。如miR-1和miR-133通過靶向作用GJA1和KCNJ2致心律失常的發生,miR-126是一種內皮細胞特異性microRNA，在心肌梗死后維護血管的完整性。miR-21、miR-195、miR-133，miR-208參與了心肌肥厚發生發展過程，miR-21、miR-29參與了心肌纖維化的發生。?

發明內容

本發明提供了一種microRNA?let-7e在制備抗缺血性心律失常藥物中的應用。也包括含有microRNA?let-7e的載體或者宿主細胞在制備抗缺血性心律失常藥物中的應用。?

microRNA?let-7e不僅能夠抑制正常心肌β₁-腎上腺素受體（β₁-AR）的表達，而且還能夠抑制急性心肌缺血情況下心臟β₁-AR的上調。另外，miRNA?let-7e能有效的抑制急性心肌缺血狀態下心律失常的發生，其作用效果等同甚至優于傳統的β-AR阻滯劑心得安及β₁-AR阻滯劑美托洛爾。?

與以往的β受體阻斷劑的作用機制不同的是，microRNA?let-7e是通過抑制β₁-受體蛋白的表達水平而發揮作用，并不是直接作用于受體的蛋白質。而傳統的β受體抑制劑是直接作用于受體，而影響受體的功能。對于影響受體的表達而非直接作用于受體，這樣可能使得對受體功能的影響更加明確。因此，microRNA?let-7e作為一種新型的β受體抑制劑，可應用于抗缺血性心律失常的預防和治療。?

附圖說明

圖1為microRNA?let-7e對β₁-AR?mRNA3’非翻譯區（3’UTR）靶向作用的檢測圖，其中，圖1A為Targetscan網站預測人類、大鼠和小鼠microRNA?let-7和β₁-AR?mRNA3’UTR的結合位點，圖1B為熒光報告基因檢測技術檢測人類microRNA?let-7對β₁-AR?mRNA3’UTR的靶向結合作用圖，圖1C為熒光報告基因檢測技術檢測大鼠microRNA?let-7對β₁-AR?mRNA3’UTR的靶向結合作用圖；?

圖2為microRNA?let-7e對乳鼠原代心肌細胞β₁-AR表達的調節作用圖，其中圖2A為乳鼠心肌細胞分別轉染let-7e擬似物、let-7e反義核苷酸（AMO-let-7e）和陰性對照序列（NC）后，心肌細胞內microRNA?let-7e的表達水平圖；圖2B為乳鼠心肌細胞分別轉染let-7e擬似物、let-7e反義核苷酸（AMO-let-7e）和陰性對照序列后，β₁-AR?mRNA的表達水平圖；圖2C為乳鼠心肌細胞分別轉染let-7e擬似物、let-7e反義核苷酸（AMO-let-7e）和陰性對照序列后，β₁-AR蛋白的表達水平圖；?