[發(fā)明專利]一種HPLC法分析分離(-)苯甲酰科立內(nèi)酯光學(xué)異構(gòu)體的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310652110.1
• 申請日: 2013-12-05
• 公開（公告）號: CN103604895A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈婕;喬春蓮;楊波;羅巖
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢武藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/60
• 分類號: G01N30/60;G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 北京鼎佳達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11348
• 代理人: 侯蔚寰

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬涉及一種高效液相色譜法，尤其是一種分析分離(-)苯甲酰科立內(nèi)酯及其光學(xué)異構(gòu)體的高效液相色譜法。

背景技術(shù)

(-)苯甲酰科立內(nèi)酯為一種合成前列腺素類藥物的常用中間體或起始原料，其分子式為C₁₅H₁₆O₅，化學(xué)名為(3aR,4S,5R,6aS)-(-)-5-(苯甲酰氧基)-六氫-4-(羥甲基)-2H-環(huán)戊并[b]呋喃-2-酮，結(jié)構(gòu)式為

該分子中含有4個(gè)手性中心，理論上存在多個(gè)光學(xué)異構(gòu)體，但結(jié)合其合成方法及反應(yīng)機(jī)理分析最有可能存在的只有一個(gè)光學(xué)異構(gòu)體，即為（+）苯甲酰科立內(nèi)酯，該雜質(zhì)可通過后續(xù)反應(yīng)，殘留在前列素類藥物中，影響藥品質(zhì)量。因此，控制(-)苯甲酰科立內(nèi)酯中光學(xué)異構(gòu)體的含量，對提高前列素類藥物的質(zhì)量、保證廣大患者用藥的安全性具有重大意義。

對于(-)苯甲酰科立內(nèi)酯的光學(xué)異構(gòu)體雜質(zhì)，在藥物合成過程當(dāng)中是需要進(jìn)行質(zhì)量控制的。含手性碳原子的光學(xué)異構(gòu)體的分離一直是手性藥物合成和制劑過程中質(zhì)量控制的難點(diǎn)，經(jīng)文獻(xiàn)檢索，未見（-）苯甲酰科立內(nèi)酯光學(xué)異構(gòu)體檢測方法的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種分析分離(-)苯甲酰科立內(nèi)酯及其光學(xué)異構(gòu)體雜質(zhì)的高效液相色譜法，從而實(shí)現(xiàn)(-)苯甲酰科立內(nèi)酯與其光學(xué)異構(gòu)體雜質(zhì)的分離測定。

發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，以纖維素類手性柱，以正相混合溶劑為流動相，可以將(-)苯甲酰科立內(nèi)酯及其光學(xué)異構(gòu)體進(jìn)行有效分離，從而可以準(zhǔn)確控制(-)苯甲酰科立內(nèi)酯的質(zhì)量。本發(fā)明的方法能簡單、快速、準(zhǔn)確地分析分離(-)苯甲酰科立內(nèi)酯及其光學(xué)異構(gòu)體雜質(zhì)。

進(jìn)一步地，選用纖維素類手性柱AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)，可以獲得更好的分析分離效果。

進(jìn)一步地，本發(fā)明的正相溶劑選用正己烷和無水乙醇的混合溶劑。

本發(fā)明的方法中的流動相選用體積比例為80:20～95:5正己烷和無水乙醇的混合溶劑。

本發(fā)明所述的分析分離方法，可按照以下方法實(shí)現(xiàn)：

(1)取(-)苯甲酰科立內(nèi)酯樣品適量，用無水乙醇溶解樣品，配制成每1ml含(-)苯甲酰科立內(nèi)酯0.5～1.5mg的樣品溶液。

(2)設(shè)置流動相流速為0.4～1.2ml/min，檢測波長為220nm，色譜柱柱溫箱為25～40℃，色譜柱柱溫的最佳溫度為40℃。

(3)取(1)的樣品溶液2～50μl注入液相色譜儀，完成(-)苯甲酰科立內(nèi)酯及其光學(xué)異構(gòu)體的分析與分離。

其中：

色譜柱：AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)纖維素手性色譜柱；

流動相：正己烷-無水乙醇=92:8；

柱溫：40℃；

檢測波長：220nm；

流速：1.0ml/min；

進(jìn)樣體積：20μl。

本發(fā)明采用纖維素類AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)手性色譜柱，能夠有效的分析分離(-)苯甲酰科立內(nèi)酯及其光學(xué)異構(gòu)體（雜質(zhì)）；選擇流動相溶解樣品，確保了溶液的穩(wěn)定性；選擇進(jìn)樣體積20μl，柱溫為30℃，提高了色譜峰的對稱性。本發(fā)明解決了含(-)苯甲酰科立內(nèi)酯及其光學(xué)異構(gòu)體的原料的分析與分離問題，從而確保了(-)苯甲酰科立內(nèi)酯的質(zhì)量可控。

附圖說明

圖1：正己烷-無水乙醇=89:11，柱溫40℃的HPLC圖：

圖2：正己烷-無水乙醇=92:8，柱溫35℃的HPLC圖：

圖3：正己烷-無水乙醇=92:8，柱溫40℃的HPLC圖：

圖4：正己烷-無水乙醇=95:5，柱溫40℃的HPLC圖；

附圖中：

1號峰為異構(gòu)體(+)苯甲酰科立內(nèi)酯

2號峰為(-)苯甲酰科立內(nèi)酯。

具體實(shí)施方式：

實(shí)施例1

儀器與條件

色譜柱：AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)；

流動相：正己烷-無水乙醇=89:11；

柱溫：40℃；

流速：1.0ml/min；

進(jìn)樣體積：20μl；

檢測波長：220nm；

實(shí)驗(yàn)步驟