[發(fā)明專利]瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP I-plus在制備抗肝炎病毒藥物中的應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310649000.X
• 申請日: 2013-12-06
• 公開（公告）號: CN103611150A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱家勇;盧雪梅;金小寶;汪潔
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東藥學院
• 主分類號: A61K38/10
• 分類號: A61K38/10;A61K48/00;A61P1/16;A61P31/14;A61P31/20
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林麗明

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus在制備抗肝炎病毒藥物中的應用。

背景技術(shù)

病毒黏附宿主細胞是病毒進入宿主細胞完成其復制、增殖、擴散感染等系列過程的首要步驟。近年研究發(fā)現(xiàn)肝細胞表面分子－硫酸乙酰肝素蛋白聚糖?(HSPG)是乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、戊型肝炎病毒（HEV）等多種肝炎病毒的初始黏附受體，在這些肝炎病毒感染早期的細胞黏附中起著關(guān)鍵性作用，決定著病毒的宿主選擇性和組織靶向性以及細胞的易感性。而丁型肝炎病毒（HDV）是一種利用HBV?包膜蛋白進入肝細胞中的衛(wèi)星擬病毒，至今為止還沒有針對HDV?感染的有效治療。阻斷肝炎病毒與宿主細胞硫酸乙酰肝素蛋白聚糖之間的結(jié)合，從而有效阻斷這些肝炎病毒入侵肝細胞，是治療急慢性肝炎病毒感染的有效措施之一。

環(huán)子孢子蛋白（circumsporozoite?protein,?CSP）是覆蓋于瘧原蟲子孢子表面的主要蛋白，通過與肝細胞膜上的HSPG?特異性結(jié)合，可介導子孢子特異性粘附于肝細胞膜上，進而入侵肝細胞。最近的研究發(fā)現(xiàn)，包含CSP保守?I?區(qū)和其上游序列的?19?個氨基酸的小肽段?(CSP?I-plus)?是環(huán)子孢子蛋白粘附結(jié)合肝細胞的主要功能域，可特異性靶向結(jié)合肝細胞表面分子HSPG。???

????迄今為止，未見瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus抗肝炎病毒的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中缺乏有效的抗肝炎病毒藥物的缺陷，提供瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus?在制備抗肝炎病毒藥物中的應用。

本發(fā)明的另一個目的是提供瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus編碼基因在制備抗肝炎病毒藥物中的應用。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus編碼基因的重組表達載體在制備抗肝炎病毒藥物中的應用。

本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：

本發(fā)明通過將肝細胞與瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus預孵后，再加入肝炎病毒攻擊，發(fā)現(xiàn)肝細胞表面結(jié)合的肝炎病毒明顯減少，而且培養(yǎng)一段時間后細胞上清中病毒蛋白和?DNA水平明顯降低，以上結(jié)果表明瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus可明顯阻斷肝炎病毒與肝細胞的結(jié)合。因此，CSP?I-plus有望進一步開發(fā)成為新型入胞抑制劑，用于預防肝炎病毒原發(fā)感染和/或用于治療病毒性肝炎。基于上述研究，本發(fā)明瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus在制備抗肝炎病毒藥物中的應用；瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus編碼基因在制備抗肝炎病毒藥物中的應用；含有如上所述的瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus編碼基因的重組表達質(zhì)粒在制備抗肝炎病毒藥物中的應用。瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

肝炎病毒指引起病毒性肝炎的病原體。人類肝炎病毒有甲型、乙型、丙型、丁型、戊型和庚型病毒等之分；目前研究發(fā)現(xiàn)肝細胞表面分子－硫酸乙酰肝素蛋白聚糖?(heparan?sulfateproteoglycans，HSPG)是乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、戊型肝炎病毒（HEV）等多種肝炎病毒的初始黏附受體，在這些肝炎病毒感染早期的細胞黏附中起著關(guān)鍵性作用，決定著病毒的宿主選擇性和組織靶向性以及細胞的易感性，而丁型肝炎病毒（HDV）是一種利用HBV?包膜蛋白進入肝細胞中的衛(wèi)星擬病毒。所以說，瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白多肽CSP?I-plus對這些類型的肝炎病毒都有抑制作用。

本發(fā)明的有益效果是：

本發(fā)明將CSP?I-plus與肝細胞預孵后，研究發(fā)現(xiàn)：肝細胞表面結(jié)合的肝炎病毒明顯減少，培養(yǎng)一段時間后細胞上清病毒蛋白和?DNA水平明顯降低，表明CSP?I-plus可明顯阻斷肝炎病毒與肝細胞的結(jié)合。此外，本發(fā)明的CSP?I-plus是多功能的，還具有肝靶向性。因此，CSP?I-plus有望進一步開發(fā)成為新型入胞抑制劑，用于預防肝炎病毒感染(?如暴露后預防、垂直傳播或者肝移植的再感染的預防等)和/或與干擾素或核苷類似物用于治療急慢性病毒性肝炎（防止原初細胞的感染/被治愈細胞的再感染），包含CSP?I-plus基因的重組表達載體有望進一步開發(fā)成為抗肝炎病毒的新型基因藥物，具有良好的臨床應用前景。

說明書附圖