[發明專利]流速可控的層析柱

有效

• 申請號: 201310644877.X
• 申請日: 2013-12-05
• 公開（公告）號: CN103691157A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 朱輝;石蕊
• 申請（專利權）人: 成都雅途生物技術有限公司
• 主分類號: B01D15/22
• 分類號: B01D15/22
• 代理公司: 成都華典專利事務所(普通合伙) 51223
• 代理人: 徐豐;楊保剛

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技術領域

????本發明屬于生物純化器械，具體涉及一種流速可控的層析柱。?

背景技術

目前，多種化合物的組合物、天然產物及中藥的分離純化，主要是采用柱色譜，使用層析柱，通過柱層析過程來實現。傳統的柱色譜是將混合化合物放置在玻璃柱柱床的頂端，使混合溶劑組成的洗脫劑(?流動相)?在重力作用下，通過裝有吸附性介質材料(?固定相)?的垂直玻璃柱，分離得到各個較純的產品(?純品)，其原理是：由于混合化合物中各組分對色譜柱中固定相和流動相的親和力不同，故根據混合化合物的性質選擇合適的固定相和流動相，可以達到將其中各組分盡可能分離的目的，分離的產品在柱子出口分別被收集到各個收集瓶中，然后，鑒定各個收集瓶中的收集到的層析液，根據鑒定結果合并和濃縮各相同層析液，得到各個純品。?

目前的層析柱存在以下問題：1.?在進行層析操作時不能控制液體的流速，如果樣品液的流速過快，很容易造成目的蛋白與柱體內填料接觸時間過短而不宜被吸附，如果洗脫液的流速過快，也不容易將目的蛋白交換洗滌下來；如果流速過慢，又會增加層析時間，由于流速的沒有被量化，在下次處理同樣或者相似的蛋白時，無法提供參考；2.?在進樣時，樣品溶液從層析柱頂端的中部直接流進柱體，容易造成柱體內填料飛濺至層析柱的內壁上。由于層析用的填料常常是比較昂貴的，飛濺至內壁上的填料沒有在層析中得到充分的利用，影響層析效果。?

發明內容

為解決上述問題，本發明提供一種可拆分的層析柱，采用如下技術方案：?

一種流速可控的層析柱，包括柱頭和柱體，所述柱頭與柱體為螺紋連接，其特征在于，所述柱頭的頂部設有供硅膠軟管通過的通孔；所述柱體的頂部設置可拆卸的U型篩網，所述U型篩網為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，所述U型篩網的側壁含有通孔；所述U型篩網的上部放置中速定性濾紙濾膜，所述濾膜的表面積大于或者等于U型篩網的表面積；所述柱體的底部通過螺紋連接與柱尾連接，所述柱尾的底部設有出液口；所述出液口的上部設置篩板,所述篩板的孔徑為0.2~0.45μm；所述出液口的下部設置流速控制器。

優選地，所述柱頭和柱體的連接處、柱體和柱尾的連接處設有密封圈，所述的密封圈為硅膠材質。?

優選地，所述篩板的上部設置醋酸纖維膜，所述醋酸纖維膜的直徑不小于柱體的直徑。?

本發明具有如下有益效果：?

1.?本發明提供的層析柱，在柱體的頂部設置可拆卸的U型篩網，所述U型篩網為為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，并且U型篩網的側壁含有通孔，如此設置，有利于緩沖液、樣品液、洗脫液從柱體頂部進入時，是沿著柱體的四壁流下的，不會造成柱體內液體的飛濺，引起填料飛濺在柱體的四壁上，影響填料高度，從而影響蛋白的純化效果。

2.?本發明提供的層析柱，在柱體的底部設置柱尾，并且在柱尾的內部、出液口的上部設置篩板，并限定篩板的孔徑為0.2~0.45μm，并在篩板上設置醋酸纖維膜作為優選方式，如此這樣便可以達到蛋白純化時的填料不會隨著緩沖液、樣品液、洗脫液一起，從錐形出口流失，但又不會影響緩沖液、樣品液和洗脫液從錐形出口的流出效果；此外，將篩板設置在柱尾上，當純化完成后，可以打開柱尾，很方便地取出柱體內的填料。?

3.?本發明提供的層析柱，U型篩網的上部放置中速定性濾紙濾膜，可以對待分離的樣品液進行初步分離，攔截粒徑比較大的未處理完全的菌體等雜質，還可以避免層析樣品堵塞U型篩網。?

4.?本發明提供的層析柱，在柱頭和柱體的連接處、柱體和柱尾的連接處，都設有密封圈，便于柱頭和柱體、柱體和柱尾的密閉，避免緩沖液、樣品液、洗脫液從兩者的縫隙處流出，造成浪費。?

5.?本發明提供的層析柱，在出液口的下部設置流速控制器，可通過流速控制器對流速進行控制，且能夠直接讀出流速，方便實驗操作，對層析操作中的流速進行量化，有利于對以后進行相同或者相似蛋白的純化操作提供參考作用。?

6.?本發明提供的層析柱，柱頭與柱體、柱體與柱尾都是可以拆分的，層析前對其進行組裝，層析后，可以相互拆開，分別進行清洗、滅菌等處理。本發明結構簡單，操作方便，蛋白的純化效果好。?

附圖說明

????圖1為本發明的結構示意圖；其中，1表示柱頭；2表示硅膠軟管；3表示出液口；4表示流速控制器；5表示篩板；6表示U型篩網；7表示柱體；8表示柱尾。?

具體實施方式