[發(fā)明專利]一種蚯蚓提取物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310640251.1
• 申請日: 2013-12-04
• 公開（公告）號: CN104688778A
• 公開（公告）日: 2015-06-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖峰
• 申請（專利權(quán)）人: 肖峰
• 主分類號: A61K35/62
• 分類號: A61K35/62;A61P17/02
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種蚯蚓提取物.。

背景技術(shù)

蚯蚓(Earthworm)屬環(huán)節(jié)動物門(Annelida)寡毛剛(Oligochaeta)無脊椎動物，藥名地龍，在中藥領(lǐng)域已經(jīng)有四千多年的利用史，具有清熱息風(fēng)、活血通絡(luò)、消腫止痛的功效。長期使用證明蚯蚓提取物對人體皮膚燒燙傷的部位能夠起到散熱、止痛、消腫、解毒、生肌的作用，治療燙傷迅速而不留疤痕。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，國內(nèi)外研究人員對蚯蚓的藥理作用和臨床效果不斷有新的進展。

在專利CN102675468?A中公開一種蚯蚓提取物及其提取方法和應(yīng)用，將冰凍蚯蚓1kg，切成小段，用預(yù)先冷卻的蒸餾水沖洗，至完全無血色為止；絞成肉泥，加入預(yù)冷的勻漿液，用膠體磨反復(fù)勻漿；所得勻漿液離心，取上清，加入95％乙醇使其終濃度達到60％，4℃放置并攪拌，4h后離心，取上清；所得上清真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇至濃縮液體積為500ml；濃縮液冷凍干燥，得到蚯蚓多肽粗提物，-20℃保存為凍干品待用。但是該發(fā)明所提取的為蚯蚓所含的多肽，蛋白含量并不多，且操作復(fù)雜，成本較高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種蚯蚓提取物的提取方法，該方法能夠低成本地提取出蚯蚓所含有的蛋白。

為達到以上目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明首先挑選蚯蚓，將其體表污物洗凈，冷凍后，將其剪碎，放于離心管中，加入約PBS。往離心管中倒入小鐵珠，置于多樣品組織研磨機中，采用60HZ的頻率研磨60s。在12000rpm的離心機4℃條件下離心，離心15min，取上清液，即為蚯蚓總蛋白提取液。運用BCA蛋白濃度測定試劑盒對蚯蚓總蛋白提取液進行定量，并將提取液稀釋成不同蛋白濃度備用，將蚯蚓總蛋白提取液保存于-80℃冰箱備用。

本發(fā)明的有益效果在于：

本發(fā)明提取方法簡單易操作，提取的蚯蚓提取物中蛋白含量高，本發(fā)明為闡明蚯蚓體腔蛋白部分理化特性和生物活性提供思路，也為蚯蚓治療燙傷及傷口愈合等應(yīng)用提供依據(jù)，為利用現(xiàn)代技術(shù)對中醫(yī)藥民間驗方進一步研究開發(fā)提供新的思路。

具體實施方式

以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進一步說明：

具體實施例1：

取蚯蚓一條，將其體表污物洗凈，置于冰上，剪取約500μg，將其剪碎，放于1.5ml離心管中，加入約1ml?PBS。往離心管中倒入2-3粒小鐵珠，置于多樣品組織研磨機中，60HZ的頻率60s。12000rpm，4℃，離心15min，取上清，即為蚯蚓總蛋白提取液。運用BCA蛋白濃度測定試劑盒對蚯蚓總蛋白提取液進行定量，并將提取液稀釋成不同蛋白濃度備用，將蚯蚓總蛋白提取液保存于-80℃冰箱備用。