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[發明專利]一種茶樹離體再生體系的構建方法有效

專利信息
申請號: 201310639259.6 申請日: 2013-12-04
公開(公告)號: CN103609453A 公開(公告)日: 2014-03-05
發明(設計)人: 孫威江;吳婉婉;陳志丹;何碧珠 申請(專利權)人: 福建農林大學
主分類號: A01H4/00 分類號: A01H4/00
代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100 代理人: 蔡學俊
地址: 350002 福*** 國省代碼: 福建;35
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 茶樹 再生 體系 構建 方法
【說明書】:

技術領域

發明屬于茶樹組織培養技術領域,具體涉及一種茶樹離體再生體系的構建方法。

背景技術

茶樹(Camellia?sinensis?L.?Kuntze.)屬山茶科,山茶屬,是一種多年生的木本、常綠植物。茶樹組織培養開始于上個世紀60年代,我國關于茶樹組織培養的研究起步較晚,但近年來在科研人員的共同努力下也取得了顯著性的進展,已經通過對茶樹的種子、莖段、腋芽、花藥等進行培養獲得了完整的再生植株。但茶樹組織培養中存在一些問題,使組織培養技術在茶樹中的應用受到了很大的限制,其主要問題表現在以下幾個方面:①?將快速繁殖技術應用于茶樹生產性育苗,以試管苗的不定芽或腋芽作外植體時,成梢率低,生長慢,培養周期長,無根茶苗生根相對較難,移栽大田成活率低;②?對于不同茶樹品種,組織培養結果差異較大,可比性小,甚至于同一茶樹品種的組織培養結果也難以重復,穩定性較差,無法形成一套完整可靠的方法體系;③?基因工程已成為植物遺傳改良的有力手段,基因操作的成敗取決于離體植物的再生,但茶樹的再生技術還不夠成熟,無法建立高頻率、穩定的再生體系。福鼎大白茶是一個綜合性狀優良、全國推廣和引種面積最大的茶樹品種,是茶樹育種工作中的一個骨干親本,本發明以福鼎大白茶莖段為外植體,研究其再生體系的建立方法,不僅有利于保持茶樹品種的遺傳穩定性,還可促進茶樹種質資源的保存。

發明內容

本發明的目的在于提供一種茶樹離體再生體系的構建方法,本方法以性狀優良的福鼎大白茶的莖段為外植體,建立其再生體系,不僅有利于保持茶樹品種的遺傳穩定性,還可促進茶樹種質資源的保存。

為實現上述目的,本發明采用如下技術方案:

一種茶樹離體再生體系的構建方法,其特征在于:所述茶樹離體再生體系的構建是采用帶腋芽莖段作為外植體進行培養,而不經過誘導愈傷組織直接成苗;

其建立方法包括步驟如下:

1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后,在MS+1.5?mg/L?6-BA?+0.3mg/L?NAA培養基上培養30-35d;

2)、當芽長至3-5cm時,將其切成長1-1.5cm的莖段接入MS+1.0mg/L?6-BA?+?0.1mg/LNAA培養基上進行增殖;

3)、當增殖的芽苗長至4-5片葉時,在1/2?MS+0.2?mg/L?NAA培養基上進行生根培養;

4)、當生根培養的組培苗根長至5-6cm,平均4-5條根時,進行煉苗移栽,在室外培養茶樹植株。

所述的帶腋芽莖段為福鼎大白茶莖段,將所述帶腋芽莖段進行培養,腋芽萌發后,向上長葉,向下生根。

本發明的顯著優點在于:

(1)、本發明提供的茶樹離體再生體系的構建方法,以綜合性狀優良、全國推廣和引種面積最大的茶樹品種福鼎大白茶的莖段作為外植體,不僅有利于保持茶樹品種的遺傳穩定性,還可促進茶樹種質資源的保存,并可為日后茶樹的提純復壯提供理論基礎。

(2)、本發明所建立的茶樹離體再生體系的構建方法,可不經誘導愈傷組織直接成苗,培養周期短,成梢率高,移栽大田成活率高,且方法穩定、可靠,經反復實驗均能得到較好的結果。

具體實施方式

實施例1

一種茶樹離體再生體系的建立方法,具體包括步驟如下:

1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后,在MS+1.5?mg/L?6-BA?+0.3mg/L?NAA培養基上培養30d;

2)、當芽長至3?cm時,將其切成長1?cm的莖段接入MS+1.0mg/L?6-BA?+?0.1mg/LNAA培養基上進行增殖;

3)、當增殖的芽苗長至4片葉時,在1/2?MS+0.2?mg/L?NAA培養基上進行生根培養;

4)、當生根培養的組培苗根長至5cm,平均5條根時,進行煉苗移栽,將組培苗移栽至室外培養30d后,植株成活率為67?%,且植株生長狀況較好,葉片翠綠。

實施例2

一種茶樹離體再生體系的建立方法,具體包括步驟如下:

1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后,在MS+1.5?mg/L?6-BA?+0.3mg/L?NAA培養基上培養32?d;

2)、當芽長至4?cm時,將其切成長1?cm的莖段接入MS+1.0mg/L?6-BA?+?0.1mg/LNAA培養基上進行增殖;

3)、當增殖的芽苗長至5片葉時,在1/2?MS+0.2?mg/L?NAA培養基上進行生根培養;

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