[發明專利]快速測定蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒及使用方法

有效

• 申請號: 201310636371.4
• 申請日: 2013-12-03
• 公開（公告）號: CN103675249A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 范仁俊;高越;封云濤;張潤祥;庾琴;劉中芳;郭瑞峰;史高川;郭曉君
• 申請（專利權）人: 山西省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 太原華弈知識產權代理事務所 14108
• 代理人: 李毅

技術領域

本發明涉及害蟲敏感性快速檢測技術領域，具體地說涉及一種快速、簡便測定蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒及使用方法。

背景技術

蘋果黃蚜（Aphis?citricola?von?der?Goot）屬半翅目Hemiptera蚜科Aphididae，又名繡線菊蚜，以成蟲、若蟲刺吸葉和枝梢的汁液，葉片被害后向背面橫卷，影響新梢生長及樹體發育，是蘋果樹上的主要害蟲之一。為有效控制蘋果黃蚜的危害，需要明確其對常用藥劑的敏感性，便于科學選藥和用藥。目前常用點滴法或浸蟲法，通過比較田間品系和敏感品系對常用藥劑的致死中量（LD₅₀）的區別，來確定其敏感度。一是專業技術性強，二是工作量大，三是耗費時間較長，不能及時為指導用藥提供依據。

近年來，一種更為簡便的研究病蟲害敏感性的方法逐漸受到研究人員的重視，即診斷劑量法。診斷劑量法亦分兩種，一種為平坡診斷法，另一種為區分劑量法。黃斌、郭瑩、尤民生等人采用平坡診斷法分別研究了小菜蛾、黃曲條跳甲的敏感性，呂要斌等人亦采用平坡診斷法研究了田間小菜蛾種群對茚蟲威的敏感性，結果表明診斷劑量法與浸液法具有相似結論，并發現平坡診斷法比浸液法更簡便，在定性判別是否產生抗藥性時具有較高可信度；高希武、羅萬春、李國清等人分別采用區分劑量法研究了盲蝽、棉蚜、馬鈴薯甲蟲、小菜蛾、棉鈴蟲的抗藥性，確定了部分害蟲的敏感基線和抗性診斷劑量。診斷劑量法相比傳統方法更為簡便，尤其是區分劑量法在確定區分劑量后，研究病蟲害敏感性時較為便捷。但是，在現有相關技術方面未見采用診斷劑量法研究蘋果黃蚜對農藥敏感性的報道；現有對蘋果黃蚜敏感性的檢測常用點滴法或浸蟲法，其通過比較田間品系和敏感品系對常用藥劑的致死中量（LD50）的區別，來確定其敏感度，現有技術存在如下問題：一是專業技術性強，須專業技術人員操作；二是檢測設施復雜，工作量大；三是耗費時間較長，檢測時間均在10小時以上，不能及時為指導用藥提供依據。為指導田間科學用藥，增強其實用性和便捷性，供基層科技人員或農民使用，發明人研究了快速測定蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感性的方法，并開發出了診斷試劑盒。

發明內容

本發明的目的是提供一種快速、簡便測定蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒及使用方法，使用該診斷試劑盒，能在2小時內快速測定和判斷蘋果黃蚜對啶蟲脒的敏感性，為指導田間科學用藥提供簡便快捷的用具和方法。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案。

本發明的快速測定蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒由玻璃管、藥膜及棉塞構成。所述的玻璃管為長7.5-10?cm、直徑1.5-2.5?cm的指形管；所述的藥膜是將500μL濃度為啶蟲脒0.19?mg/L的丙酮溶液均勻涂抹于指形管內壁及底部，滾動晾干后形成；所述的棉塞是經消毒處理后的脫脂棉制成；將晾干的指形管塞上棉塞即制成診斷試劑盒。

本發明的快速測定蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒的使用方法是：將準備好的啶蟲脒診斷試劑盒帶到田間，打開棉塞，把20頭大小一致的蘋果黃蚜成蟲輕掃入指形管內，然后再塞上棉塞，60分鐘后檢查死亡率。若死亡率大于等于60%，表明被測試的蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感度較高，可以用常規的啶蟲脒濃度及用量進行防治；若死亡率低于60%，則表明被測試的蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感度較低，應改用其他敏感度較高的農藥。

采用本發明的快速測定蘋果黃蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，能在2小時內快速、簡便的判斷蘋果黃蚜對啶蟲脒的敏感性，與現有診斷方法相比，診斷試劑盒操作簡單，使用方便，普通農民經過簡單的培訓即會操作；極大地簡化了診斷設施，診斷工作量也減少到最小；大大縮短了診斷時間，在2小時內便可得出診斷結果。為科學有效地指導田間防治蘋果黃蚜提供科學依據，避免造成常規用量的農藥防治效果差，造成果園的經濟損失，或超常規用藥造成環境污染。

藥膜中農藥的濃度及用量試驗

1、試驗藥劑：啶蟲脒原藥。

2、試驗種群和材料：

蘋果黃蚜敏感品系（S）：溫室內自然繼代生長4年，期間未接觸過任何藥劑。

蘋果黃蚜抗性品系（R）：田間采集。?

供試昆蟲：蘋果黃蚜Aphis?citricola。

敏感品系（S）：采集于太原市小店區孫家寨溫室大棚。

抗性品系（R）：采集于太原市小店區孫家寨果園，啶蟲脒抗性倍數為3.01倍。