[發(fā)明專利]一種抗腫瘤基因磁性復(fù)合納米顆粒及制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310634210.1 | 申請日： | 2013-12-02 |
| 公開（公告）號： | CN103667345A | 公開（公告）日： | 2014-03-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張東生;張佳;林梅 | 申請（專利權(quán)）人： | 東南大學 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C12N15/66;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 江蘇永衡昭輝律師事務(wù)所 32250 | 代理人： | 王斌 |
| 地址： | 210096*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 腫瘤 基因 磁性 復(fù)合 納米 顆粒 制備 方法 | ||
1.一種抗腫瘤基因磁性復(fù)合納米顆粒的制備方法，其特征在于，該方法包括下述步驟：
1）以pIRES-CMVE-Egr1p真核表達質(zhì)粒為模板，進行聚合酶鏈式反應(yīng)，得到輻射誘導(dǎo)啟動子片段，將其亞克隆至pCDNA3.1-EGFP質(zhì)粒上，得到pCDNA3.1-Egr1-EGFP真核表達質(zhì)粒；
2）以載有熱啟動子和自殺基因的質(zhì)粒為模板，進行聚合酶鏈式反應(yīng)，得到熱啟動子片段和抗腫瘤基因片段；
3）將抗腫瘤基因片段亞克隆至所述步驟1）中得到的pCDNA3.1-Egr1-EGFP真核表達質(zhì)粒中，取代EGFP，得到pCDNA3.1-Egr1-?HSV-TK真核表達質(zhì)粒；
4）將熱啟動子片段亞克隆至所述pCDNA3.1-Egr1-HSV-TK真核表達質(zhì)粒上，得到pCDNA3.1-Egr1-?Hsp70-?HSV-TK真核表達質(zhì)粒；?
5）按多聚乙烯亞胺負載的Mn0.5Zn0.5Fe2O4納米粒與pCDNA3.1-Egr1-Hsp70-?HSV-TK真核表達質(zhì)粒質(zhì)量比為20：1~50：1，將二者分別用無血清培養(yǎng)基稀釋，室溫放置5分鐘以上，然后將二者的稀釋溶液混和均勻，室溫下孵育30分鐘以上，獲得pEgr1-Hsp70-HSV-TK/PEI-MZF-NPs復(fù)合物，即為抗腫瘤基因磁性復(fù)合納米顆粒。
2.一種抗腫瘤基因磁性復(fù)合納米顆粒，其特征在于，該復(fù)合納米顆粒按照權(quán)利要求1所述方法制備得到。
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