[發(fā)明專(zhuān)利]提高硫酸軟骨素含量的制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310632537.5
• 申請(qǐng)日: 2013-11-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103804518A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉乃山;陸玉梅;遲培升;夏襯來(lái)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 青島九龍生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C08B37/08
• 分類(lèi)號(hào): C08B37/08
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生化制藥領(lǐng)域，特別是直接從動(dòng)物軟骨中提取的對(duì)心腦血管病等有良好的效果的硫酸軟骨素鈉的生產(chǎn)工藝的改進(jìn)。

背景技術(shù)

硫酸軟骨素鈉，英文名Chondroitin?sulfate?sodium，是動(dòng)物軟骨中提取的酸性粘多糖，多存在于動(dòng)物的軟骨、喉骨、鼻骨(41％)、牛、馬中膈和氣管中，其分子結(jié)構(gòu)為β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖通過(guò)β1→3糖苷鍵形成的重復(fù)二糖單位所組成的多糖鏈。

硫酸軟骨素鈉主要用于治療風(fēng)濕和類(lèi)風(fēng)濕疾病的藥物，還具有抗凝、抗癌、抗血栓、降血脂等作用，可用于治療頭痛、偏頭痛、冠心病、心絞痛等癥狀。在國(guó)外，對(duì)硫酸軟骨素鈉藥理的研究已經(jīng)達(dá)到分子水平。

目前國(guó)內(nèi)提取硫酸軟骨素鈉的方法主要有三種：鹽解法、堿解法和酶解法。主要采用的分離純化技術(shù)有：乙醇沉淀法、離子交換色譜法、纖維素分離法、季銨鹽配合法、吸附法、區(qū)帶電泳分離法等。在以上的集中提取方法中，收率雖然可以達(dá)到很高的水平，但生產(chǎn)方法都存在很大問(wèn)題，如鹽解法工藝中存在除酸性蛋白調(diào)節(jié)PH值1-2在產(chǎn)品量大時(shí)耗時(shí)很長(zhǎng)，硫酸軟骨素中的氨基易被解離下來(lái)，從而影響了硫酸軟骨素的含量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是：提供一種提高硫酸軟骨素含量的制備方法，此方法通過(guò)復(fù)沉，并控制乙醇濃度，使生產(chǎn)的硫酸軟骨素沉淀質(zhì)地疏松、顆粒細(xì)小、容易脫水和烘干，且產(chǎn)品不需要粉碎，能耗低，質(zhì)量高且穩(wěn)定。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是該制備方法包括下列步驟：

1、堿提酶解：將動(dòng)物軟骨原料加水浸泡，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH8.5-9.5，升溫至50-60℃，保溫4-6小時(shí)，加入胰蛋白酶，保持PH8.5-9.5，保溫50-60℃，并攪拌6小時(shí)，升溫至溶液沸騰10-20分鐘，用微孔濾膜過(guò)濾得硫酸軟骨素溶液；

2、乙醇沉淀：將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，邊攪拌便加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為1-5％，然后加入溶液體積2-3倍的濃度為90％以上的乙醇，靜置6-8小時(shí)，用微孔濾膜過(guò)濾得硫酸軟骨素沉淀；

3、氧化：將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入水中溶解，同時(shí)水中加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為1-5％，含硫酸軟骨素重量濃度為3.5-5.5％，調(diào)節(jié)PH至9.5-11.5，加入1-3.5％的過(guò)氧化氫氧化6-8小時(shí)，過(guò)濾得濾液；

4、復(fù)沉：調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5.5-6.5，溫度控制在15-25℃，邊攪拌，邊將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到體積為硫酸軟骨素溶液4.5-6.5倍的，濃度為90％以上的乙醇中，緩慢加完后繼續(xù)攪拌1小時(shí)，靜置沉淀10-15小時(shí)；

5、脫水干燥：沉淀結(jié)束后棄去上層酒精，收集沉淀物，用濃度為95％以上的乙醇脫水，然后干燥即得硫酸軟骨素成品。

本方法進(jìn)一步改進(jìn)方案是，所述乙醇濃度為90％或90％以上。其中，步驟(4)的溶液含乙醇的濃度始終保持在75％或75％以上。

本發(fā)明取得的效果為：

1、將經(jīng)過(guò)堿提、酶解氧化得到的硫酸軟骨素溶液，調(diào)節(jié)PH5.5-6.5，溫度控制在15-25℃，緩慢的加入到攪拌中的90％的乙醇中，整個(gè)沉淀過(guò)程中乙醇的濃度始終保持在75％及其以上。經(jīng)此方法沉淀得到的硫酸軟骨素質(zhì)地疏松，顆粒細(xì)小，容易脫水和烘干，不需要粉碎，具有節(jié)約能源、節(jié)約生產(chǎn)成本的優(yōu)點(diǎn)。

2、所得產(chǎn)品色澤好，質(zhì)量穩(wěn)定，且硫酸軟骨素含量在98.5％以上。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

(1)堿提酶解：將動(dòng)物軟骨原料100kg加水浸泡，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH9.0，升溫至50-60℃，保溫5小時(shí)，加入2kg胰蛋白酶，保持PH9.0，保溫50-60℃，并攪拌6小時(shí)，升溫至溶液沸騰15分鐘，用微孔濾膜過(guò)濾得硫酸軟骨素溶液600L；

(2)乙醇沉淀：將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，邊攪拌便加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為18kg，然后加入溶液體積2.5倍的濃度為90％以上的乙醇1500L，靜置7小時(shí)，用微孔濾膜過(guò)濾得硫酸軟骨素沉淀；

(3)氧化：將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入250L水中溶解，同時(shí)水中加入7.5kg氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為3％，含硫酸軟骨素重量濃度為5％，調(diào)節(jié)PH至11，加入5kg過(guò)氧化氫氧化8小時(shí)，過(guò)濾得濾液；

(4)復(fù)沉：調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5.5-6.5，溫度控制在18℃，邊攪拌，邊將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到濃度為90％1250L的乙醇中，緩慢加完后繼續(xù)攪拌1小時(shí)，靜置沉淀15小時(shí)；

(5)脫水干燥：沉淀結(jié)束后棄去上層酒精，收集沉淀物，用濃度為95％以上的乙醇脫水，然后干燥即得硫酸軟骨素成品15.1kg，含量98.6％。