[發(fā)明專利]萊茵衣藻的油脂代謝途徑相關(guān)基因和蛋白以及基因突變藻株及其應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310628458.7
• 申請日: 2013-11-28
• 公開（公告）號: CN103695445A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 田朝光;齊西珍;盧麗娜;呂和鑫;曲戈;馬延和
• 申請（專利權(quán)）人: 天津工業(yè)生物技術(shù)研究所
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N9/10;C12N15/55;C12N9/20;C12N15/113;C12N15/79;C12N1/13;C12R1/89
• 代理公司: 北京尚誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11322
• 代理人: 魯兵

1.油脂代謝途徑相關(guān)基因AT，來源于萊茵衣藻（Chlamydomonas?reinhardtii），是下述核苷酸序列之一：

1）序列表中SEQ?ID?NO：1的DNA序列；

2）編碼序列表中SEQ?ID?NO：2的DNA序列；

3）與序列表中SEQ?ID?NO：1限定的核苷酸序列具有90％以上同源性并具有轉(zhuǎn)移乙酰輔酶A酰基功能的乙酰轉(zhuǎn)移酶的核苷酸序列；

4）在高嚴謹條件下可與序列表中的SEQ?ID?NO：1限定的DNA序列雜交的核苷酸序列。

2.權(quán)利要求1所述油脂代謝途徑相關(guān)基因AT編碼的蛋白AT，是下述氨基酸殘基序列之一：

1）序列表中的SEQ?ID?NO：2；

2）將序列表中SEQ?ID?NO：2的氨基酸殘基序列經(jīng)過一至十個氨基酸殘基的取代、缺失或添加并具有轉(zhuǎn)移乙酰輔酶A酰基功能的乙酰轉(zhuǎn)移酶的蛋白質(zhì)。

3.油脂代謝途徑相關(guān)基因TAGLP，來源于萊茵衣藻（Chlamydomonas?reinhardtii），是下述核苷酸序列之一：

1）序列表中SEQ?ID?NO：3的DNA序列；

2）編碼序列表中SEQ?ID?NO：4的DNA序列；

3）與序列表中SEQ?ID?NO：3限定的核苷酸序列具有90％以上同源性并具有還原三酰甘油成二酰甘油功能的甘油三酯脂肪酶的核苷酸序列；

4）在高嚴謹條件下可與序列表中的SEQ?ID?NO：3限定的DNA序列雜交的核苷酸序列。

4.權(quán)利要求3所述油脂代謝途徑相關(guān)基因TAGLP編碼的蛋白TAGLP，是下述氨基酸殘基序列之一：

1）序列表中的SEQ?ID?NO：4；

2）將序列表中SEQ?ID?NO：4的氨基酸殘基序列經(jīng)過一至十個氨基酸殘基的取代、缺失或添加并具有還原三酰甘油成二酰甘油功能的甘油三酯脂肪酶的蛋白質(zhì)。

5.含有權(quán)利要求1或3所述基因的表達載體、轉(zhuǎn)基因細胞系或宿主菌。

6.抑制權(quán)利要求1所述AT基因表達的RNA(microRNA)，是序列表的序列5所示的RNA；或抑制權(quán)利要求3所述TAGLP基因表達的RNA(microRNA)是序列表的序列6所示的RNA。

7.權(quán)利要求6所述RNA(microRNA)的編碼序列，具體的，所述AT基因RNA(microRNA)的編碼序列可為序列表的序列7所示的DNA；所述TAGLP基因RNA(microRNA)的編碼序列可為序列表的序列8所示的DNA。

8.含有權(quán)利要求7所述編碼序列的基因沉默載體；具體的，所述基因沉默載體是將所述能合成AT基因或TAGLP基因的RNA(microRNA)及其反向互補序列的編碼基因插入pChlamiRNA2載體的多克隆位點得到的重組載體；更具體的，

所述AT基因沉默載體中的RNA(microRNA)及其反向互補序列的編碼基因，命名為AT-miDNA，可具有下述雙鏈核苷酸序列：有義鏈（正義鏈，不做模板的DNA鏈）具有序列表中序列9的核苷酸序列或在高嚴謹條件下可與序列表中序列9限定的DNA序列雜交的核苷酸序列；反義鏈（做模板的DNA鏈）具有序列表中序列10的核苷酸序列或在高嚴謹條件下可與序列表中序列10限定的DNA序列雜交的核苷酸序列；攜帶AT-miDNA的pChlamiRNA2載體命名為pChlamiRNA2/AT-miDNA（簡稱AT-mic-RNA2）；或

所述TAGLP基因沉默載體中的RNA(microRNA)及其反向互補序列的編碼基因，命名為TAGLP-miDNA，可具有下述雙鏈核苷酸序列：有義鏈（正義鏈，不做模板的DNA鏈）具有序列表中序列11的核苷酸序列或在高嚴謹條件下可與序列表中序列11限定的DNA序列雜交的核苷酸序列；反義鏈（做模板的DNA鏈）具有序列表中序列12的核苷酸序列或在高嚴謹條件下可與序列表中序列12限定的DNA序列雜交的核苷酸序列；攜帶TAGLP-miDNA的pChlamiRNA2載體命名為pChlamiRNA2/TAGLP-miDNA（簡稱TAGLP-mic-RNA2）。