[發(fā)明專(zhuān)利]一種提高肝素鈉收率的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310625724.0
• 申請(qǐng)日: 2013-11-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103804524A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉乃山;周曉娜;遲培升;夏襯來(lái)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 青島九龍生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C08B37/10
• 分類(lèi)號(hào): C08B37/10
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• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本法說(shuō)明涉及一種提取提純制備原料藥的方法，屬于化學(xué)領(lǐng)域，具體是一種制備高純度高收率精品肝素鈉。

背景技術(shù)

肝素鈉是由豬或牛的腸粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬粘多糖類(lèi)物質(zhì)，在動(dòng)物體內(nèi)多以肝素鈉-蛋白質(zhì)復(fù)合物的形式存在。醫(yī)學(xué)上，肝素鈉在體內(nèi)外均有抗凝血作用，可延長(zhǎng)凝血時(shí)間、凝血酶原時(shí)間和凝血酶時(shí)間。臨床上具有抗凝血、降血脂、保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞、抗血小板積聚和釋放、促纖溶、抑制動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、降低血液粘度和抗炎等作用。

我國(guó)是世界上最大的肝素鈉原料藥生產(chǎn)國(guó)，制備原料藥肝素鈉的方法主要有兩種：生物酶法，化學(xué)裂解法。生物酶法主要以酶降解產(chǎn)生肝素鈉，方法溫和，但是成本很高，不適合批生產(chǎn)：另一種化學(xué)裂解法，產(chǎn)量多，但是過(guò)程中會(huì)影響肝素鈉的活性，不適應(yīng)藥用。本工藝吸取了以上兩種工藝的優(yōu)點(diǎn)，多種萃取、提取和離子交換方法，方法溫和，提取量相對(duì)較大，純度較高，而且能夠最大限度的去除肝素鈉的雜質(zhì)，比如多硫酸軟骨素。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的為了改進(jìn)現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種制備高純度高收率肝素鈉的工藝；該發(fā)明提供了一種簡(jiǎn)便的高純度肝素鈉制備技術(shù)，制得的肝素鈉效價(jià)均高于180U/mg，高于中國(guó)藥典要求的170U/mg，且依據(jù)中國(guó)藥典肝素鈉檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)合格。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種制備高純度肝素鈉的工藝，其步驟如下：

1、將粗品肝素鈉溶入飲用水中，攪拌5-10小時(shí)，將其全部溶解；

2、將步驟1中溶解液，用鹽酸溶液調(diào)PH至7.0-8.0，然后升溫至50-55℃之間時(shí)加入胃蛋白酶，再加入胰酶，保溫2-4小時(shí)；

3、將步驟2中酶解液在30～40分鐘內(nèi)升溫至85-90℃，靜止10-30分鐘，攪拌，然后等降溫至50-55℃時(shí)，用氫氧化鈉溶液調(diào)PH至10.0-12.0，靜止20-30小時(shí)，分層，虹吸上清，過(guò)濾，留上清液待沉淀，下層沉淀放離心機(jī)離心，離心后留上層離心液；

4、待步驟3中上清液和離心液溫度降至20-30℃，加入氯化鈉，攪拌溶解，用鹽酸調(diào)PH至10.0-12.0，邊攪邊加濃度為75-80％乙醇溶液，沉淀10-12小時(shí)；

5、取步驟4中下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液將溶液調(diào)PH至10.0-12.0，然后加入雙氧水氧化10-12小時(shí)；

6、將步驟5中溶液加入氯化鈉，攪拌溶解后，用鹽酸溶液將溶液調(diào)PH至6.0-7.0，加入乙醇溶液，沉淀10-12小時(shí)；

7、取步驟6中下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液調(diào)PH至10.0-12.0，然后加入體積3-5％雙氧水，氧化10-12小時(shí)；

8、將步驟7中溶液加入氯化鈉，用鹽酸溶液調(diào)PH至10.0-12.0，邊攪邊加濃度為95～97％的乙醇溶液，沉淀10-12小時(shí)；

9、取步驟8中下層沉淀物用純化水溶解，用氫氧化鈉溶液調(diào)PH至10.0-12.0，然后加入雙氧水，氧化10-12小時(shí)；

10、將步驟9中溶液加入氯化鈉，用鹽酸溶液調(diào)PH至6.0-7.0，然后冷凍至-10℃--5℃，邊攪邊加丙酮，在-5℃-0℃中保溫24-30小時(shí)，棄去上清液，多硫酸軟骨素被丙酮帶走，用純化水將沉淀物溶解，加入氯化鈉，用鹽酸溶液調(diào)PH至6.0-7.0，邊攪邊加乙醇，沉淀10-12小時(shí)；

11、將步驟10中沉淀物用純化水溶解后，用微米濾膜板框機(jī)微濾，用乙醇沉淀，再加入氯化鈉溶液，靜止沉淀10-12小時(shí)，取沉淀物，用乙醇溶解，靜置24-30小時(shí)；棄去上層液，將不銹鋼砂芯棒放在產(chǎn)品中，用真空泵通抽干；

12、將步驟11中產(chǎn)品放在真空干燥箱中，烘干70-80小時(shí)，得產(chǎn)品。

有益效果：

1、本發(fā)明結(jié)合升溫氧化結(jié)合多種物理提取方法并純化得到效價(jià)高于180U/mg，收率高于80％的高純度肝素鈉。

2、通過(guò)升溫補(bǔ)加雙氧水可以有效的控制肝素鈉氧化失活，并且實(shí)現(xiàn)了氧化與脫色同步進(jìn)行。

3、依據(jù)肝素鈉及其結(jié)構(gòu)類(lèi)似物的極性差異，在氯化鈉溶液中用丙酮萃取，在用乙醇沉淀洗脫，最后得到肝素鈉產(chǎn)品。工藝采用的丙酮萃取法，使得多硫酸軟骨素雜質(zhì)被萃取，而肝素鈉產(chǎn)品留在了低鹽溶液中，用乙醇沉淀，極大地提高了收率，最終得到的肝素鈉產(chǎn)品達(dá)到中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)，并且經(jīng)測(cè)不含多硫酸軟骨素成分。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

(1)將50g粗品肝素鈉溶入飲用水中，攪拌5小時(shí)，將其全部溶解；

(2)用鹽酸溶液調(diào)PH至7.0，然后升溫至50℃之間時(shí)加入5g/億單位胃蛋白酶，再加入10g/億單位胰酶，保溫2小時(shí)；