[發明專利]一種提高肝素鈉純度的方法

有效

• 申請號: 201310625606.X
• 申請日: 2013-11-24
• 公開（公告）號: CN103804522A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 劉乃山;周曉娜;遲培升;夏襯來
• 申請（專利權）人: 青島九龍生物醫藥有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本法說明涉及一種提取提純制備原料藥的方法，屬于化學領域，具體是一種制備高純度精品肝素鈉。

背景技術

肝素鈉是由豬或牛的腸粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬粘多糖類物質，在動物體內多以肝素鈉-蛋白質復合物的形式存在。醫學上，肝素鈉在體內外均有抗凝血作用，可延長凝血時間、凝血酶原時間和凝血酶時間。臨床上具有抗凝血、降血脂、保護內皮細胞、抗血小板積聚和釋放、促纖溶、抑制動脈平滑肌細胞增殖、降低血液粘度和抗炎等作用。

2008年2月11日，美國因注射肝素鈉出現4例死亡，350多例不良反應，成為轟動世界的“肝素鈉事件”。經過專家論證，上述死亡和不良反應是由于肝素鈉中含有多硫酸軟骨素所致。多硫酸軟骨素是類肝素的一種，其性質與肝素鈉基本相似，經過檢測與肝素鈉的區別是：1、肝素鈉是右旋結構；而多硫酸軟骨素是左旋結構；2、所含陰離子強度有差異。3、多硫酸軟骨素經檢測比肝素鈉的分子量大。

國際肝素鈉供應商對此相當重視，因此我公司一直致力于此項研究中，收獲多多。

發明內容

本發明提供了一種萃取法分離肝素鈉中的多硫酸軟骨素的方法，是為了攻克國內外專家關于肝素鈉中的多硫酸軟骨素不能分離的定論，利用多硫酸軟骨素的性質，用離子交換樹脂交換和乙醇沉淀，從而實現用萃取法將肝素鈉與多硫酸軟骨素徹底分離。

本發明的技術方案為：一種制備高純度肝素鈉的工藝，其步驟如下：

1、粗品肝素鈉溶入飲用水中，攪拌5—10小時，將其全部溶解；

2、將步驟1中溶解液，用鹽酸溶液調PH至7.0—8.0，然后升溫至50-55℃之間時加入5-15g／億單位胃蛋白酶，再加入5-25g／億單位胰酶，保溫2-4小時；

3、將步驟2中酶解液在30～40分鐘內升溫至85-90℃，靜止10—30分鐘，攪拌，然后等降溫至50-55℃時，用1-3mol／L氫氧化鈉溶液調PH至10.0-12.0，靜止20—30小時，分層，過濾，留上清液待沉淀，下層沉淀放離心機離心，離心后留上層離心液；

4、待步驟3中上清液和離心液用弱堿性離子交換樹脂吸附，用0.3—0.4g／L的氯化鈉洗脫，連續洗脫兩遍。

5、取步驟4中洗脫液，用2-6mol／L氫氧化鈉溶液調PH至10.0-12.0，然后加入3—5％雙氧水，氧化10—12小時；

6、將步驟5中溶液用70-75％乙醇沉淀，再加入20-30g／L氯化鈉溶液，靜止沉淀10—12小時，取沉淀物，用70—75％乙醇溶解，靜置24-30小時，棄去上層液，將不銹鋼砂芯棒放在產品中，用真空泵通抽干；

7、將步驟6中產品放在真空干燥箱中，烘干70-80小時，得產品。

有益效果：

(1)本發明結合升溫氧化結合多種物理提取方法并純化得到效價高于180U／mg，收率高于80％的高純度肝素鈉。

(2)通過升溫補加雙氧水可以有效的控制肝素鈉氧化失活，并且實現了氧化與脫色同步進行。

(3)依據肝素鈉及其結構類似物的極性差異，在氯化鈉溶液中用離子交換樹脂，再用乙醇沉淀洗脫，最后得到肝素鈉產品。工藝采用的方法，使得多硫酸軟骨素雜質被萃取，而肝素鈉產品留在了低鹽溶液中，用乙醇沉淀，極大地提高了收率，最終得到的肝素鈉產品達到中國藥典標準，并且經測不含多硫酸軟骨素成分。

具體實施方式

實施例1

(1)將50g粗品肝素鈉溶入飲用水中，攪拌5小時，將其全部溶解；

(2)將溶解液用鹽酸溶液調PH至7.0，然后升溫至50℃之間時加入5g／億單位胃蛋白酶，再加入5g／億單位胰酶，保溫2小時；

(3)將酶解液在30分鐘內升溫至85℃，靜止10分鐘，攪拌，然后等降溫至50℃時，用1mol／L氫氧化鈉溶液調PH至10.0，靜止20小時，分層，過濾，留上清液待沉淀，下層沉淀放離心機離心，離心后留上層離心液；

(4)待上清液和離心液用弱堿性離子交換樹脂吸附，用0.3g／L的氯化鈉洗脫，連續洗脫兩遍；

(5)取洗脫液用2mol／L氫氧化鈉溶液調PH至10.0，然后加入3％雙氧水，氧化10小時；

(6)將溶液用70％乙醇沉淀，再加入20g／L氯化鈉溶液，靜止沉淀10小時，取沉淀物，用70％乙醇溶解，靜置24小時，棄去上層液，將不銹鋼砂芯棒放在產品中，用真空泵通抽干；