[發明專利]一種藻類中提取多糖的提取方法

在審

• 申請號: 201310622053.2
• 申請日: 2013-11-30
• 公開（公告）號: CN103724675A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 陳宏;李梅;劉興勇;時慧
• 申請（專利權）人: 青島海之林生物科技開發有限公司
• 主分類號: C08L3/04
• 分類號: C08L3/04;C08L5/00;C08B37/00;A61P3/06;A61P39/06;A61P37/04
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技術領域

本發明屬海洋生物醫藥領域，特別涉及一種藻類中提取多糖的提取方法。

背景技術

海藻為海產藻類植物的通稱。中藥海藻為馬尾藻科海蒿子或羊棲菜的干燥藻體,具有軟堅散結,?消痰利水的功能。臨床用于治療癭瘤,?睪丸腫痛,?痰飲水腫等癥?。現代研究表明,海藻具有增強免疫能力、抑制病毒和抗腫瘤的活性等作用。這些生物活性與其所含的藻類中提取多糖密切相關。據報道藻類中提取多糖是自然界廣泛分布的一種非還原性雙糖。其分子結構獨特,?化學性質穩定。藻類中提取多糖是一類高效的生物吸附劑,?海澡多糖具有降血脂、抗氧化、免疫調節等作用,?藻類中提取多糖衍生物可作為細胞物質的寒冷保護介質。海藻糖這些奇妙的生物學特性,?使其在醫藥、食品、化妝品、農業等方面具有廣闊的應用前景。藻類中提取多糖的開發已成為國際范圍的研究熱點。

發明內容

本發明提供一種藻類中提取多糖的提取方法，按照以下步驟進行：

（1）將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎；

（2）稱取100g?海藻粉末,?加85~90%?乙醇回流提取4~6?小時,?過濾,?藥渣干燥后,?加水超聲提取5?次,?每次10min?過濾,?合并濾液于80~90?℃濃縮至比重為1.03，醇沉,18~24h??醇沉濃度為75%；離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物；

（3）粗提物經活性碳脫色,?Sevage?法脫蛋白,?流水透析法脫小分子,?醇沉,?真空干燥得藻類中提取多糖。

（4），多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物，在外滅菌15秒后，密封包裝。

藻類中提取多糖的含量測定按照以下方法進行：

標準曲線制作:?精密稱取葡萄糖標準品12.50mg?溶于100ml?的容量瓶中,得到0.1250mg/?ml?的葡萄糖標準溶液。從標準溶液中,?分別吸取0.0、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0ml,?加水至1ml。再加10%?的苯酚溶液1ml、濃硫酸5ml,?搖勻后放置5min,?置沸水浴放置15min,?取出冷卻至室溫。在490nm?測其吸光度。得吸光度與濃度的回歸方程:?A=?53186C+?010108。(?r=?019990)?。

穩定性實驗稱取:?取已知濃度的多糖溶液0.5ml,?加水至1ml,?迅速加1ml?10%?的苯酚溶液、5ml?濃硫酸,?搖勻后放置5min,?置沸水浴放置15min,?取出冷卻至室溫。在490nm?測其吸光度。實驗中發現其吸光度在0~?25min?內穩定。

回收率試驗:?吸取5?份已知濃度的藻類中提取多糖溶液,?各加標準葡萄糖溶液,?依法測定吸光度,?由回歸方程計算回收率。經計算，其回收率為95%以上，藻類中提取多糖含量提取率為4.26~4.36%。

本發明從海藻中提取藻類中提取多糖,?并可根據其具有較強的生物吸附能力、降血脂、抗氧化、增強免疫調節活性等,?將其開發成功能食品及藥品,?或制備微膠囊。藻類中提取多糖將可能成為人類主要的藥物資源。藻類中提取多糖的含量測定采用傳統的苯酚-?硫酸法,?方法簡便,?回收率高,?重現性好,?數據可信。

本發明一種藻類中提取多糖的提取方法，方法簡便快速,?重現性好,?回收率高。

具體實施方式

?????本發明所用海藻為浙江象山產，所用化學試劑為市購。

實施例1

一種藻類中提取多糖的提取方法，按照以下步驟進行：

（1）將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎；

（2）稱取100g?海藻粉末,?加90%?乙醇回流提取4?小時,?過濾,?藥渣干燥后,?加水超聲提取5?次,?每次10min?過濾,?合并濾液于80~90?℃濃縮至比重為1.03，醇,?24h??醇沉濃度為75%；離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物；

（3）粗提物經活性碳脫色,?Sevage?法脫蛋白,?流水透析法脫小分子,?醇沉,?真空干燥得藻類中提取多糖4.36g.

（4），多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物，在外滅菌15秒后，密封包裝。

實施例2

一種藻類中提取多糖的提取方法，按照以下步驟進行：