[發明專利]一種化妝品微生物的檢測方法

無效

• 申請號: 201310620826.3
• 申請日: 2013-11-29
• 公開（公告）號: CN103642891A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 郭狄
• 申請（專利權）人: 中山鼎晟生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12Q1/06;C12Q1/14;C12R1/385;C12R1/445
• 代理公司: 中山市銘洋專利商標事務所(普通合伙) 44286
• 代理人: 鄒常友

發明領域

本發明涉及化妝品微生物檢驗技術領域，具體的說，本發明涉及一種化妝品中細菌的檢驗技術領域。

背景技術

隨著生活水平的不斷提高，化妝品已經成為人們日常生活中不可或缺的必需品。化妝品的種類與數量與日俱增，同時其衛生質量倍受管理部門和消費者的重視，而化妝品微生物學指標(菌落總數、霉菌和酵母菌、糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌)?是日常化妝品檢測的必檢指標(除少數含有75%乙醇和染發產品以外)。

????化妝品是人們的日常用品，化妝品因原料中存在油脂、蛋白質、淀粉、維生素、水分等眾多營養性成分，為微生物的滋生和繁殖提供了良好的營養環境。微生物會將化妝品中的營養成分代謝分解，致使化妝品腐敗變質，不僅使化妝品的色、香、味及劑型發生變化，而且可能對使用者的健康造成嚴重危害。因此，化妝品中一些有害微生物的分離與檢測是當前化妝品衛生質量控制的重要問題。隨著我國經濟的快速發展，人民的生活水平不斷提高，對化妝品的需求量也越來越大。人們在使用化妝品的同時，對化妝品衛生指標也越來越重視。由于一些工廠對化妝品生產過程中的微生物標準控制得不好，造成上市的部分化妝品細菌含量嚴重超標，甚至檢出了致病菌。這種消息常見諸報端，引起了消費者的恐慌。如何控制好微生物指標，確保生產出衛生指標合格的產品，更好地為廣大消費者服務，是擺在化妝品制造廠商面前一個急需解決的重要課題。

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發明內容

為了使化妝品微生物檢測進一步簡單快捷，本發明針對目前《化妝品衛生規范》方法中對應的檢測方法，對微生物的檢測方法進行了如下的改良簡單方便，更利于實際應用。

????本發明提供了對化妝品中微生物的檢驗方法進行了改進。

本發明的技術方案：針對目前《化妝品衛生規范》方法中對應的檢測方法，結合日常檢測，我們發現，糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌在卵磷脂吐溫80營養瓊脂培養基上菌落形態比較典型，同時也比較好辨認，為了使化妝品微生物檢測進一步簡單快捷，本發明用SCDLP增菌液代替生理鹽水直接稀釋樣品，用SCDLP增菌液代替乳糖膽鹽對糞大腸菌群增菌，將SCDLP增菌液增菌后的樣品，轉種在卵磷脂吐溫80營養瓊脂培養基上分離，直接在此培養基中挑取可疑的糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌菌落進行革蘭氏染色和進一步的生化鑒定，省略伊紅美蘭、乙酰胺和BP三種培養基對糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌三種致病菌的分離。

卵磷脂吐溫80營養瓊脂不含有抑制細菌生長的物質，是廣譜培養基，因此，糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌，在卵磷脂吐溫80營養瓊脂上均應生長良好。本文嘗試SCDLP增菌后用卵磷脂吐溫80營養瓊脂平板對三種致病菌進行分離，試驗表明三種菌在卵磷脂吐溫80營養瓊脂平板上均生長良好，并伴有典型菌落特征。

有益效果：本發明化妝品中微生物的檢驗方法與現有技術相比，用增菌液代替生理鹽水以及糖膽鹽對糞大腸菌群增菌，將增菌后的樣品，轉種在卵磷脂吐溫80營養瓊脂培養基上分離，直接在此培養基中挑取可疑的菌群、菌落進行革蘭氏染色和進一步的生化鑒定，省略了對糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌三種致病菌的分離。改進后的檢驗法簡單明了，可操作性強，大大降低了分析成本，方法簡單，無復雜步驟，易于推廣應用，可以用于化妝品的日常快速檢測。

下面，結合實施例對本發明化妝品中微生物的檢驗方法的技術特征作進一步的說明。

1?備檢液制備

樣品1:10備檢液?無菌操作稱取親水性樣品稱10g(ml)±0.1g(ml)加到90ml?SCDLP增菌液的玻璃瓶中;疏水性樣品稱10g(ml)±0.1g(ml)加5ml經滅菌的吐溫80，加到75ml?SCDLP增菌液的玻璃瓶中，經充分混勻制成1:10的樣品制備液。

樣品1:100備檢液?吸取以上樣品備檢液10ml，加到90ml?SCDLP增菌液的稀釋瓶中，制成1:100的樣品備檢液。

陽性對照?濃度為10²的大腸埃希菌標準菌株AMMS8099和白色念珠菌ATCC10231作為菌落總數和霉菌和酵母菌陽性對照。大腸埃希菌AMMS8099、金黃色葡萄球菌NICPBP26112、銅氯假單胞菌NICPBP10211標準菌株，菌液濃度為10¹混合液10ml加入90ml?SCDLP增菌液中作為致病菌的陽性對照。

2?菌落總數檢測