[發明專利]一種橄欖苦苷對照品的制備方法

在審

• 申請號: 201310618221.0
• 申請日: 2013-11-25
• 公開（公告）號: CN104650163A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 夏凱特
• 申請（專利權）人: 夏凱特
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

(一)技術領域

本發明屬化工技術領域，特別涉及一種橄欖苦苷對照品的制備方法。

(二)背景技術

橄欖苦苷存在于植物油橄欖中，具有良好的降血脂、抗氧化、抗菌作用。我國目前已大量引種栽培油橄欖，盛產含橄欖苦苷的原料，以油橄欖為原料的各種保健品、化妝品、藥品紛紛面市。但目前制備橄欖苦苷的方法為用50％的甲醇提取粉碎的橄欖葉，然后揮去溶劑。其水溶液用氯仿萃取，水層經氯化鈉飽和后過濾，再用乙酸乙酯萃取。

分離：利用低壓柱用10％、20％、35％、40％、70％、100％不同濃度乙醇洗脫；橄欖苦苷在35％左右得到。

現有技術中存在的不足如下：

1.分離步驟較多且較為繁瑣，低壓柱分離效果不佳，所得到的產品純度低，且嚴重影響收率。

2.在分離過程中，使用了毒性較強的氯仿等溶劑，易造成環境污染，且不利于操作人員的健康。

3.在分離過程中，由于沒有采取保護措施，因橄欖苦苷極不穩定，影響取得高純度的對照品。

目前尚無有效監測橄欖苦苷含量的方法，一般只能以油橄欖含量來評價橄欖苦苷含量，由于不同產地、不同條件生產的油橄欖，其橄欖苦苷含量是有很大差別的，故而這種評價也是不準確的。

(三)發明內容

本發明的目的在于制備一種橄欖苦苷對照品的制備方法，

已知有關橄欖苦苷的提取工藝流程如下：

經查詢，尚未有與本發明近似的橄欖苦苷提取、純化工藝。

本發明的目的在于提供一種橄欖苦苷對照品的制備方法，填補國內未有此對照品生產的空白，并且工藝比較簡單，可以從含橄欖苦苷的原料中提取得到含量為98％以上的橄欖苦苷，可作為含橄欖苦苷的植物原料及成品中定性定量的對照品。

將含橄欖苦苷的干燥橄欖葉置于容器中，加入甲醇，經過適當提取方法提取后，減壓濃縮揮去甲醇，沉淀加水溶解，其水溶液經氯化鈉飽和后，濾過，濾液經乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯再飽和氯化鈉溶液洗滌；提取物上于中壓柱分離，用不同濃度的乙醇(水：乙醇，1：0—100)洗脫，分部收集，結合TLC檢測，減壓濃縮，即得橄欖苦苷粗品；將從中壓柱洗脫下來的橄欖苦苷經葡聚糖柱進一步分離純化得到橄欖苦苷晶體(純度＞98％)。

本發明的優點是：整個工藝簡單流程短，易于掌握，且收率高，所用的溶劑毒性很小，對生產操作及環境保護都有利。

(四)附圖說明

圖1為本發明橄欖苦苷(Oleuropein)HPLC色譜圖

(五)具體實施方式

試驗例：

取干燥橄欖葉100g，分別3次加80％甲醇500、300、300ml，超聲提取30分鐘，過濾，濾液在50度減壓濃縮；沉淀加水溶解，其水溶液經氯化鈉飽和后，濾過，濾液經乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯再飽和氯化鈉溶液洗滌；提取物上于ODS中壓柱分離，用10％、20％、25％、30％、40％、45％、50％、100％不同濃度乙醇洗脫；分部收集，結合TLC檢測，將25％乙醇洗脫部分，減壓濃縮，即得橄欖苦苷粗品；將從中壓柱洗脫下來的橄欖苦苷經葡聚糖柱進一步分離純化得到橄欖苦苷晶體(純度＞98％)。

結構鑒定：

1.物理形狀：

橄欖苦苷(Oleuropein)為米白色粉末，易溶于乙醇、甲醇、丙酮、吡啶、冰醋酸和50％的氫氧化鈉溶液，溶于水、醋酸乙酯，幾乎不溶于乙醚、石油醚、氯仿和苯。

2.波譜鑒定：

2.1質譜鑒定：由譜圖得出，該化合物分子量為540左右，與文獻值相符。

2.2NMR鑒定：