[發明專利]一種促進馬尾松組培繼代芽生根方法

無效

• 申請號: 201310617394.0
• 申請日: 2013-11-27
• 公開（公告）號: CN103609450A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 姚瑞玲;吳幼媚;蔡玲
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區林業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司 45114
• 代理人: 鄒超賢

1.一種促進馬尾松組培繼代芽生根方法，其特征在于：包括叢芽誘導、叢芽伸長、繼代培養、不定根誘導、不定根伸長、試管苗移栽的兩步生根法，獲得馬尾松組培繼代芽生根苗，其操作步驟如下：

（1）叢芽誘導：將馬尾松種子消毒后，在無菌條件下進行種子萌發，然后截取帶0.5?cm長下胚軸的無菌苗頂芽為外植體，在誘導培養基Ⅰ中進行叢芽誘導；

（2）叢芽伸長：將誘導出的叢生芽在伸長培養基Ⅱ中進行伸長培養；

（3）繼代培養：將單個切下伸長芽的頂芽接種到繼代增殖培養基Ⅲ中進行增殖，獲得繼代芽Ⅰ；將繼代芽Ⅰ重復步驟（2）進行伸長，單個切下伸長的繼代芽Ⅰ并分成頂芽和帶側芽芽段，然后在步驟（3）繼代增殖培養基中繼續增殖獲得繼代芽Ⅱ，將繼代芽Ⅱ再重復步驟（2）和步驟（3），獲得新的增殖繼代芽；重復循環步驟（2）和（3），直至獲得大量足夠生根培養繼代芽；

（4）不定根誘導：單個切下生長健壯、半木質化、高2-3?cm的繼代芽，接種在含有萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）、蔗糖的1/2改良MS培養基Ⅳ中，誘導處理不定根原基21-28?d；

（5）不定根伸長：將具有肉眼可見不定根外植體轉入含有活性炭（AC）或抗壞血酸（Vc）、蔗糖的1/2改良MS培養基Ⅴ中，促進不定根的表達與伸長；

（6）試管苗移栽：將已生根的再生植株移栽于泥炭土、蛭石和珍珠巖（1∶1∶1）混合基質中培育，噴水保濕。

2.根據權利要求1所述的一種促進馬尾松組培繼代芽生根方法，其特征在于：所述的培養基Ⅰ其原料含量為：6-BA?2.5-4.0?mg·L^-1、NAA?0.05-0.1?mg·L^-1、蔗糖30000?mg·L^-1、酸水解酪蛋白500?mg·L^-1和改良MS培養基。

3.根據權利要求1所述的一種促進馬尾松組培繼代芽生根方法，其特征在于：所述的培養基Ⅱ其原料含量為：NAA?0.25-0.4?mg·L^-1或活性炭3000-5000?mg·L^-1、蔗糖30000?mg·L^-1和改良MS培養基。

4.根據權利要求1所述的一種促進馬尾松組培繼代芽生根方法，其特征在于：所述的培養基Ⅲ其原料含量為：6-BA?1.0-3.0?mg·L^-1、KT?0-1.0?mg·L^-1、NAA?0-0.3?mg·L^-1、蔗糖30000?mg·L^-1和改良MS培養基。

5.根據權利要求1所述的一種促進馬尾松組培繼代芽生根方法，其特征在于：所述的培養基Ⅳ其原料含量為：NAA?0.05-0.1?mg·L^-1、IBA?1.0-2.5?mg·L^-1、蔗糖1.0-2.0%和1/2改良MS培養基。

6.根據權利要求1所述的一種促進馬尾松組培繼代芽生根方法，其特征在于：所述的培養基Ⅴ其原料含量為：AC?3000-5000?mg·L^-1或Vc?10-30?mg·L^-1、蔗糖2.0%和1/2改良MS培養基。