[發明專利]基于信號的樣本制備

有效

• 申請號: 201310614489.7
• 申請日: 2013-11-28
• 公開（公告）號: CN103852355B
• 公開（公告）日: 2018-09-18
• 發明（設計）人: F.里森;J.格雷塞;M.朗霍斯特
• 申請（專利權）人: FEI公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 王岳;馬永利

本發明涉及基于信號的樣本制備。描述了一種用于檢測是否已在細胞樣本中發生生物事件并且隨后激活流控系統以在發生事件的時間點固定細胞的系統和方法。在一個例子中，樣本制備系統包括照相機，照相機鏈接到正詢問細胞樣本的共焦顯微鏡。一旦已發生諸如結合事件的可檢測的事件，樣本制備系統釋放固定劑以在檢測到事件的時間點固定細胞。

技術領域

本實施例涉及基于由生物樣本產生的信號來制備生物樣本的機器和方法。更具體地講，本實施例涉及一種把圖像分析用于樣本的制備的過程控制的裝置。

背景技術

關聯光學電子顯微鏡檢查(CLEM)是公知方法，該方法包括使在樣本的光學顯微鏡檢查中發現的信息與來自該樣本的電子顯微鏡檢查的信息關聯的一組過程。然而，需要執行許多不同的過程以制備已在光學顯微鏡檢查下被分析的樣本以便用于電子顯微鏡檢查。光學顯微鏡檢查用于動態活細胞，而電子顯微鏡檢查依賴于固定的處理的樣本。例如，生物標本(諸如，細胞或組織)需要被以各種方式合適地制備以使其穩定，減小其厚度(超薄切片)并且增加其電子光學對比度(染色)以便被利用電子顯微鏡檢查合適地分析。

在許多情況下，CLEM被用于研究發生在特定細胞或組織內的生物事件。例如，能夠確定引入到細胞中的熒光蛋白的動力學，然后，通過獲取樣本并且執行一系列實驗以固定并且處理該樣本，細胞被固定以用于電子顯微鏡檢查。這允許在電子顯微鏡下觀看生物樣本。然而，當前沒有用于處理通過光學顯微鏡觀察的樣本以使它們被自動地、可再現地并且方便地處理以用于電子顯微鏡檢查的全面而一致的方法。

發明內容

一個實施例是一種用于控制樣本制備的裝置，該裝置包括顯微鏡，顯微鏡被配置為提供生物樣本的圖像。還包括圖像分析模塊，圖像分析模塊被配置為分析提供的圖像以確定是否已在生物樣本中發生可檢測的事件。流控（fluidics）激活模塊也被配置為在可檢測的事件已被確定的情況下被激活，其中所述激活導致對生物樣本的處理。

另一實施例是一種用于控制生物樣本的制備的系統中的方法。這種方法包括：利用顯微鏡獲得生物樣本的圖像，并且分析圖像以確定是否已發生可檢測的事件，其中如果已發生事件，則激活流控子系統以制備用于電子顯微鏡檢查的生物樣本。

附圖說明

圖1是樣本制備系統的一個實施例的透視圖。

圖2是捕捉安裝在圖1的樣本制備系統內的樣本支架的圖像的顯微鏡的透視圖。

圖3是根據一個實施例的具有微流控通道的樣本支架的頂視圖。

圖4是用于制備樣本的系統的一個實施例的方框圖。

圖5是用于制備樣本的方法的一個實施例的流程圖。

圖6是用于檢測事件觸發的方法的一個實施例的流程圖。

具體實施方式

本發明的實施例涉及用于制備用于電子顯微鏡檢查或其它類型的進一步分析的生物樣本的樣本處理系統和方法。在一個實施例中，該系統使用光學顯微鏡成像、捕捉圖像分析和流控系統的實時反饋控制的組合來確定是否已發生特定細胞事件，然后在該時間點固定生物樣本。例如，樣本處理系統可使用高分辨率照相機來掃描生物樣本以發現可檢測的事件，諸如分子結合、形態改變、熒光或其它事件，然后觸發另一過程以在生物樣本上自動初始化所述另一過程。例如，所述另一過程可以是作為制備用于電子顯微鏡檢查的樣本中的第一步驟的快速凍結生物樣本。

因此，通過調整如這里所述的樣本處理系統以便例如每當發生預定生物事件時總是固定特定樣本，如這里所述的樣本處理系統能夠提供用于電子顯微鏡檢查的可再現的樣本制備。因此，如以下所討論，通過分析附著于抗體的熒光染料或金色微球體何時結合到細胞表面并且隨后觸發固定反應，一系列的細胞樣本能夠被一致地處理。與在觀察到特定事件時手工觸發的當前系統相比，在確定在光學顯微鏡下發生的特定細胞事件時的固定反應的自動實時觸發導致具有完全可再現的結果的樣本制備系統。