[發明專利]一種用于檢測肉制品中殘留鎮定劑類藥物的方法

有效

• 申請號: 201310610823.1
• 申請日: 2013-11-25
• 公開（公告）號: CN103616467A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 譚貴良;趙天珍;羅北照;袁秀金
• 申請（專利權）人: 廣東省中山市質量計量監督檢測所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 中山市科創專利代理有限公司 44211
• 代理人: 尹文濤

【技術領域】

本發明涉及檢測肉制品中殘留藥物的方法，尤其是一種用于檢測肉制品中殘留鎮定劑類藥物的方法。

【背景技術】

鎮靜劑類藥物（Sedatives）是指能緩和激動，對中樞神經系統有抑制作用，起到減輕或消除動物狂躁不安，恢復安靜的一類藥物。常用的藥物有：苯二氮草類的地西泮、硝西泮、奧沙西泮，吩噻嗪類的氯丙嗪、異丙嗪、奮乃靜，以及安乃近、苯巴比妥等。該類藥物除具有鎮靜作用外，很多還是一類生長促進劑，被用于動物飼料添加劑，當豬等動物吃了添加上述鎮定劑的飼料時，使其嗜睡少動、促進其快生長，且可其改變肉質。這些藥物可對人體中樞神經系統造成不良反應，我國及許多其他國家已將此類藥物列為禁用藥物。但是近年來一些商販在畜禽飼養及運輸過程中擅自非法使用鎮靜劑類藥物，導致畜禽產品中該類藥物的殘留，造成畜禽產品存在安全隱患，嚴重威脅人們的身體健康。

常見用于檢測肉制品所殘留鎮靜劑類藥物的方法主要有：酶聯免疫吸附法（ELISA）、高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜-質譜法（LC-MS）、氣相色譜-質譜法（GC-MS）等，目前在鎮定劑類藥物殘留檢測方面用得最多的是LC-MS，該檢測方法被農業部等部門定為標準方法使用，食品方面所涉及的檢測樣本主要為豬肉和豬腎。但由于LC-MS所涉及的設備昂貴，目前該方法還無法在大部分檢測實驗室普及使用。

本發明即針對現有技術的不足而研究提出。

【發明內容】

本發明要解決的技術問題是提供一種用于檢測肉制品中殘留鎮定劑類藥物的方法，該方法通過C₁₈固相萃取柱萃取后，用氣相色譜-質譜法（GC-MS）進行檢測，可快速準確地測定肉制品中所殘留鎮靜劑類藥物的種類及含量，包括有地西泮、奧沙西泮、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖、苯巴比妥和異丙嗪7種鎮靜劑類藥物。

為解決上述技術問題，本發明一種用于檢測肉制品中殘留鎮定劑類藥物的方法，采用如下技術方案：

本發明一種用于檢測肉制品中殘留鎮定劑類藥物的方法，包括步驟如下：

1）樣品提取：

A、稱取一定量肉制品樣品放入具塞離心管中，加入無水硫酸鈉和提取溶劑,加入無水硫酸鈉的重量為0.4～0.6倍肉制品樣品的重量，加入的提取溶劑與肉制品樣品V/W為5～7；

B、將A步驟所得的混合物在振蕩器上進行振蕩，得到混合物；

C、在B步驟中加入與所得混合物V/W為0.5的氨水-乙腈溶液，在渦旋混合器中混勻；

D、將C步驟所得混合物在離心機進行離心處理，得到上層清液和剩余殘留物；

E、提取D步驟所得的上層清液；

F、將向D步驟所得剩余殘留物加入與肉制品樣品V/W為3～5的乙酸-乙腈溶液，在渦旋混合器中渦旋混勻，得到上層清夜；

G、提取F步驟所得的上層清夜，并與E步驟提取的上層清液合并；

H、將G步驟所得上層清液在蒸餾瓶中加熱蒸發至干，得到殘留物；

I、將H步驟所得殘留物加入K₂HPO₄緩沖溶液，充分溶解，得到檢測樣品溶液；

2）樣品凈化：

J、依次用甲醇和蒸餾水將C₁₈固相萃取柱活化；

K、將I步驟所得檢測樣品溶液上樣至C₁₈固相萃取柱；

L、將步驟K的C₁₈固相萃取柱用洗脫溶劑洗脫，并收集洗脫液于離心試管中；

M、將L步驟所收集的洗脫液用氣體吹干，得到殘留物；

N、將M步驟所得殘留物用甲醇定容，得到樣品凈化溶液；

3）樣品檢測分析：

O、將N步驟所得樣品凈化溶液移入進樣瓶，用氣質聯用儀（GC-MS）進行分析，得出檢側數據。

所述步驟A中提取溶劑為乙腈、氨水-乙腈和乙酸-乙腈，所述步驟L中洗脫溶劑為甲醇-丙酮溶液。

所述甲醇-丙酮溶液為甲醇、丙酮按1:1的體積比配制。

所述步驟B中振蕩時間為1h，所述步驟C中渦旋混合器渦旋混勻為1min，所述D步驟中離心在4℃條件下進行，所述離心機的轉數為8000r/min，離心時間為5min。

所述C步驟中氨水-乙腈溶液為氨水、乙腈按體積比1:99配制，所述F步驟中乙酸-乙腈溶液為乙酸、乙腈按體積比1:99配制。

所述I步驟K₂HPO₄緩沖溶液的pH=7.0。