[發明專利]制備食蟹猴動物模型的飼料

無效

• 申請號: 201310608710.8
• 申請日: 2013-11-27
• 公開（公告）號: CN103609869A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 賈俊靜;韋祝梅;楊繼紅;王媛;李振明;楊波;韓銀華;蘇科龍
• 申請（專利權）人: 廣西瑋美生物科技有限公司
• 主分類號: A23K1/175
• 分類號: A23K1/175;A23K1/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于動物飼料領域，具體涉及一種能夠制備食蟹猴肝硬化動物模型的飼料。

背景技術

食蟹猴生命周期長，生物學特性與人類極其相似，是研究人類慢性疾病的最佳實驗材料，用它建立的人類疾病動物模型有利于觀察疾病及其并發癥的發生發展規律，同時為治療藥物的療效檢驗和安全性評估提供可靠的保證，已逐漸成為科學研究和藥物研究中使用較多的一種靈長類實驗動物。

為了深入研究肝硬化的發病機制及篩選有效預防和治療本病的藥物，選擇科學性、實用性、重現性的肝硬化動物模型有著十分重要的意義。由于各種動物之間的差異以及飲食習性的問題，各物種的肝損傷模型復制有較大難度。目前，雖有用高脂飼料誘導老鼠肝硬化的報道，但未見有誘導食蟹猴肝硬化的報道。

發明內容

本發明公開了一種可用于制備食蟹猴肝硬化動物模型的飼料及其制備方法。

本發明通過如下方案實現：

將常規飼料與雞蛋黃粉混合，加入液態豬油中攪拌均勻，得A；再將葡萄糖、一水硫酸鎂和脫氧膽酸鈉用熱水溶解得B；將A與B混合，攪拌均勻，60℃烘烤成稠狀，制成固體形狀，干燥，即得。其中按質量比含8％-15％豬油、5％-10％雞蛋淡黃粉、1％-2％一水硫酸鎂、1％-2％脫氧膽酸鈉、3％-8％D-葡萄糖，其余為常規飼料。

本發明提供的用于制備食蟹猴肝硬化動物模型的飼料，成本低廉，使用方便，造模成功率高，為食蟹猴肝硬化動物模型的制備提供了一個簡便的方法。具有良好的應用前景；因食蟹猴與人類基因有高度相似，通過其肝硬化的模型來研究肝病的發生機制，評價、篩選相關藥物有著重要的意義。

附圖說明：

附圖1為肝硬化組織超聲圖

附圖2為對照組B超影像

圖3為(200×)，VG染色，匯管區附近和增生的小膽管周圍出現膠原纖維

圖4為(200×)，VG染色，正常肝臟活檢組織

具體實施方式

實施例1

將8.2kg常規飼料與0.5kg雞蛋黃粉混合，加入0.8kg液態豬油中攪拌均勻，得A；再將0.3kg葡萄糖、0.1kg一水硫酸鎂和0.1kg脫氧膽酸鈉用70℃水(5L)溶解得B；將A與B混合，攪拌均勻，60℃烘烤成稠狀，制成固體形狀，干燥，即得。

實施例2

將7.2kg常規飼料與0.8kg雞蛋黃粉混合，加入1.2kg液態豬油中攪拌均勻，得A；再將0.6kg葡萄糖、0.1kg一水硫酸鎂和0.1kg脫氧膽酸鈉用70℃水(3L)溶解得B；將A與B混合，攪拌均勻，60℃烘烤成稠狀，制成固體形狀，干燥，即得。

實施例3

將6.3kg常規飼料與1kg雞蛋黃粉混合，加入1.5kg液態豬油中攪拌均勻，得A；再將0.8kg葡萄糖、0.2kg一水硫酸鎂和0.2kg脫氧膽酸鈉用70℃水(3L)溶解得B；將A與B混合，攪拌均勻，60℃烘烤成稠狀，制成固體形狀，干燥，即得。

一.食蟹猴肝硬化動物模型的建立

選取4-7歲食蟹猴雌、雄各12只，雄性8～10kg，雌性5～7kg，供給本發明飼料。

空白對照組4-7歲，雌、雄各3只，雄性8～10kg，雌性5～7kg，供給普通商業飼料。

二.食蟹猴肝纖維化診斷模式評價方法及結果

該方法包括血清生化標志物、影像學、病理組織學診斷。

1.血清生化標志物主要包括血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉移酶(AST)。

造模8-10周開始，造模組肝細胞大量壞死，肝功能顯著改變，其中對照組和造模組肝功能變化如下：

2.B超檢查

用氯胺酮10mg／kg靜脈麻醉，M7便攜式超聲儀，采用高頻腹部探頭對肝臟掃描，造模34周時，80％動物肝臟B超檢查肝臟回聲增強。

對照組B超影像(見圖2)，肝臟光點均勻光滑，肝內管道系統走行正常，紋理清楚，透聲良好。

造模組B超影像(見圖1)，肝臟光點增粗，表面不規則，崎嶇不平，肝臟實質不均勻。

3.病理組織學分析

氯胺酮10mg／kg肌肉麻醉后，B超誘導行活檢肝組織，10％中性福爾馬林固定，石蠟包埋、4um切片，制備肝組織學切片，VG染色，采用奧林巴斯顯微鏡觀察肝細胞脂肪變性與膠原纖維化增生情況，并拍鏡下照片。

造模34周時，活檢顯示匯管區附近和增生的小膽管周圍出現膠原纖維(見圖3)對照組(見圖4)。