[發(fā)明專利]一種羧甲基賴氨酸的檢測方法及應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310607487.5 | 申請日： | 2013-11-27 |
| 公開（公告）號： | CN103616466A | 公開（公告）日： | 2014-03-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 黃軼群;賴克強;孫曉華;牛麗紅;王靖 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海海洋大學(xué) |
| 主分類號： | G01N30/88 | 分類號： | G01N30/88 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 201306 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 甲基 賴氨酸 檢測 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種羧甲基賴氨酸(CML)的檢測方法，其特征在于包括如下步驟：
稱取一定質(zhì)量的待測樣品，任選的包括樣品粉碎的步驟；
樣品在硼酸鈉緩沖溶液中經(jīng)硼氫化鈉還原；然后用體積比為1-3：1三氯甲烷去除脂肪并沉淀蛋白質(zhì)；沉淀物經(jīng)鹽酸水解后，添加一定量的氘代羧甲基賴氨酸(D4-CML)，過MCX陽離子交換小柱萃取凈化；萃取液經(jīng)氮吹濃縮后重新溶解在一定體積的體積比為3-5：1甲醇-水溶液中，得到待測液；
待測液在HILIC色譜柱中以含1-3mM乙酸銨和0.05-015％甲酸的甲醇(A)-水(B)為流動相進行梯度洗脫，D4-CML和CML通過洗脫與樣品基質(zhì)分離；梯度洗脫參數(shù)為0～3min，80％～50％A；3～6min，50％A；6.1min，80％A；6.1～12min，80％A；
選用電噴霧離子源(ESI)，正離子掃描，多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)，進行對所分離的洗脫樣品進行串聯(lián)質(zhì)譜分析，測定質(zhì)譜圖中CML特征峰與相對應(yīng)的D4-CML的特征峰的高度之比，通過高度之比和所加入的D4-CML的量計算待測樣品中CML的濃度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于待測樣品為奶粉、油條或薯條。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于所述的流動相為含2mM乙酸銨和0.1％甲酸溶液的甲醇-水混合溶液，D4-CML和CML的吸收峰位于3.2-3.6min。
4.權(quán)利要求1-3任意一項所述的檢測方法的應(yīng)用，其特征在于，是用以檢測食品中的羧甲基賴氨酸含量。
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