[發明專利]一種用于擴增紅球菌的PCR引物及檢測紅球菌的方法及試劑盒無效
| 申請號： | 201310606953.8 | 申請日： | 2013-11-25 |
| 公開（公告）號： | CN103571968A | 公開（公告）日： | 2014-02-12 |
| 發明（設計）人： | 梅海;郝純;鄧詩財;李雪 | 申請（專利權）人： | 盎億泰地質微生物技術（北京）有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 馮瓊 |
| 地址： | 102200 北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 擴增 球菌 pcr 引物 檢測 方法 試劑盒 | ||
1.一對擴增紅球菌DNA的PCR引物，其特征在于，其上游引物序列如SEQ?ID?No.1所示，下游引物序列如SEQ?ID?No.2所示。
2.根據權利要求1所述的PCR引物，其特征在于，所述PCR為熒光定量PCR。
3.一種檢測紅球菌的試劑盒，其特征在于，包含用于擴增的PCR引物，其上游引物序列如SEQ?ID?No.1所示，下游引物序列如SEQ?IDNo.2所示。
4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR為熒光定量PCR。
5.一種檢測紅球菌的方法，包含以下步驟：
步驟1：配制PCR反應體系，94℃預變性10分鐘進行30個PCR循環，循環完畢后72℃延伸10分鐘；所述PCR反應體系中上游引物序列如SEQ?ID?No.1所示，下游引物序列如SEQ?ID?No.2所示；
步驟2：檢測擴增結果并進行測序比對。
6.根據權利要求5的方法，其特征在于，步驟1所述PCR循環參數為：94℃變性1min、58℃復性1min、72℃延伸1min。
7.根據權利要求5的方法，其特征在于，步驟1中所述PCR反應體系為：
其中，樣品DNA濃度為10-200ng/μL，上游引物及下游引物濃度為10-20pmol/μL。
8.根據權利要求5的方法，其特征在于，步驟2所述檢測為瓊脂糖電泳檢測450bp的條帶出現。
9.根據權利要求5-8任一項所述的方法，其特征在于，所述PCR為熒光定量PCR。
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